b胡萝卜素作用第课时　基因工程与克隆技术考点一　基因工程1．(9)

(2)为了使血清白蛋白基因在乳腺细胞中表达，需将其与乳腺白蛋白基因的启动子等重组在一起，该过程需要限制酶和DNA连接酶。将基因表达载体导入动物细胞采用显微注射技术。(3)检测目的基因是否表达出血清白蛋白，可用抗原—抗体杂交法。答案：(1)基因文库PCR引物(若填写扩增缓冲液也可)热稳定DNA聚合(Taq)(2)启动子限制酶和DNA连接显微注射(3)抗原—抗体杂交4．如图表示抗虫棉的培育过程，请据图回答下列问题：(1)图中所示的目的基因是________，构建重组Ti质粒时应该将基因插入质粒中的T??DNA上，原因是______________________________________________。(2)构建重组Ti质粒需要的酶有____________________，重组质粒除了目的基因和标记基因外，还有__________________。(3)图中显示将目的基因导入棉花细胞的方法是________法，可以将该重组质粒导入棉花细胞，而一般不能导入小麦或玉米等单子叶作物的细胞中，原因是________________________。(4)图中过程③是________，过程④的实质是__________________。

解析：(1)图中的目的基因是Bt基因，构建重组Ti质粒时要将目的基因插入Ti质粒的T??DNA中，因为农杆菌中的Ti质粒上的T??DNA(可转移的DNA)可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞中的染色体DNA上。(2)构建重组质粒要用限制酶切割目的基因和质粒，然后再用DNA连接酶将二者连接起来。重组质粒中除了有目的基因和标记基因外，还有启动子和终止子等。(3)图中显示将目的基因导入棉花细胞的方法是农杆菌转化法。农杆菌因对大多数单子叶植物没有感染能力，所以一般不用农杆菌转化法将目的基因导入单子叶植物细胞中。(4)图中过程③是将导入重组质粒的棉花细胞培养成愈伤组织的过程，该过程的名称是脱分化。过程④是再分化，再分化也是细胞分化，所以该过程的实质是基因的选择性表达。答案：(1)Bt基因T??DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上(合理即可)(2)限制酶和DNA连接酶启动子和终止子(3)农杆菌转化农杆菌对大多数单子叶植物没有感染能力(4)脱分化基因的选择性表达5．如图表示利用PCR技术获取人的胰岛素基因，并通过胚胎工程获取乳汁中能产胰岛素的奶牛的过程。请据图回答下列问题：(1)由图可以看出PCR技术遵循的原理是________________、________________。

(2)PCR完成第一次循环，除模板外还需提供的物质有________________、________________、________________。(3)①过程中，将胰岛素基因导入相应受体细胞常用的方法是________________。一般情况下，②过程得到的胚胎需培养到________________时期才能进行胚胎分割。如果胰岛素基因仅仅整合到某一对同源染色体中的一条上，且该基因得以成功表达，那么由③过程得到的两个胚胎发育而成的两头奶牛________(填“是”或“不是”)都能产生人的胰岛素。解析：(1)图中体现了PCR技术遵循碱基互补配对原则，以DNA双链为模板进行复制。另外，图中也体现了PCR技术通过控制温度来控制DNA双链的解聚与结合。(2)PCR完成第一次循环，除需要模板外，还需要提供两种引物、四种游离的脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶。(3)常用显微注射法将目的基因导入动物细胞。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。由于经胚胎分割得到的两个胚胎具有相同的遗传物质，所以由③过程得到的两个胚胎发育而成的两头奶牛都能产生人的胰岛素。答案：(1)DNA双链复制的原理DNA的热变性原理(2)两种引物四种游离的脱氧核苷酸Taq酶(或热稳定DNA聚合酶)(3)显微注射法桑椹胚或囊胚是6．如图所示为培育两种新品种草莓的流程示意图，请回答下列相关问题：(1)获取人胰岛素基因的方法有________________________________________。