b胡萝卜素作用第课时　基因工程与克隆技术考点一　基因工程1．(11)

图1中，过程表示诱导植物细胞的原生质体融合，常用的方法有物理法和化学法，其中物理法包括离心、振动、电激等；过程和过程分别表示脱分化和再分化。(2)图2中经融合处理后还需要进行至少两次筛选，第一次(利用选择培养基)是筛选出杂交瘤细胞，而未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡。第二次是筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞中只有极少数能产生特异性抗体，通过抗体阳性检测来选出目标细胞。(3)诱导动物细胞融合的方法有物理法、化学法和灭活的病毒处理法等。b胡萝卜素作用筛选出杂交瘤细胞后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠的腹水中，就可以提取大量的单克隆抗体。答案：(1)纤维素酶和果胶酶离心、振动、电激脱分化和再分化(2)杂交瘤细胞筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞(3)灭活病毒法小鼠的腹水特异性强、灵敏度高、并可以大量制备9．如图是科学家利用现代生物技术研制用于癌症治疗的鼠—人嵌合抗体的流程图。请回答下列问题：(1)利用蛋白质工程技术对鼠源杂交瘤抗体进行改造时，首先必须根据预期____________________，设计________________，进一步推测应有的氨基酸序列，最终通过基因拼接，将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因，然后导入鼠淋巴细胞中使其________。

在Ig基因表达载体构建的过程中，人和鼠的基因要用________________切割核苷酸之间的磷酸二酯键。(2)图中嵌合载体启动子位于基因的首端，它是________________识别和结合的部位，终止子是________的终点；嵌合载体中还应含有____________，以便重组DNA的鉴定和筛选。(3)图中的“抗体分泌细胞”的名称是________，检测目的基因在淋巴细胞中是否得到表达可采用____________技术。(4)在制备单克隆嵌合抗体过程中要进行筛选，第二次筛选的目的是________________________________________________________________________。解析：(1)蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)。所以，利用蛋白质工程技术对鼠源杂交瘤抗体进行改造时，首先必须根据预期嵌合抗体的功能，设计嵌合抗体的结构，进一步推测应有的氨基酸序列，最终通过基因拼接，将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因，然后导入鼠淋巴细胞中使其表达。

在Ig基因表达载体构建的过程中，人和鼠的基因要用同种限制酶切割核苷酸之间的磷酸二酯键，以产生相同的黏性末端。(2)启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，终止子是转录终止的信号；基因表达载体由启动子、终止子、目的基因和标记基因等组成，其中标记基因用于重组DNA的鉴定和筛选。(3)图中的“抗体分泌细胞”的名称是浆细胞；检测目的基因在受体细胞中是否表达，常采用抗原—抗体杂交技术。(4)制备单克隆抗体时要经过两次筛选，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是获得能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。答案：(1)嵌合抗体的功能嵌合抗体的结构表达同种限制酶(2)RNA聚合酶转录标记基因(3)浆细胞抗原—抗体杂交(4)获得能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞第课时胚胎工程、生物技术的安全性和伦理问题及生态工程考点一胚胎工程1．了解早期胚胎发育过程(填空)2．理清胚胎工程各技术间的关系(填空)3．把握胚胎移植成功的四个基础(1)发情排卵后，在一段时间内，供、受体生殖器官的生理变化相同，能为胚胎的生长发育提供相同的生理环境。(2)早期胚胎没有与母体子宫建立组织联系，为胚胎收集提供了可能。(3)受体对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，为胚胎的存活提供了可能。