b胡萝卜素作用第课时　基因工程与克隆技术考点一　基因工程1．(10)

将胰岛素基因导入草莓细胞之前，需构建基因表达载体，该过程所用到的酶有________________。完整的重组质粒，除胰岛素基因外，还必须有启动子、________以及标记基因等特殊的片段。(2)要从分子水平上检测目的基因(胰岛素基因)导入受体细胞后是否成功表达，可采用的方法是____________。(3)通过过程获得的草莓花粉细胞中，________(填“全部”或“部分”)含有胰岛素基因，理由是______________________________________________________________。解析：(1)用人工合成法、PCR扩增和从基因文库中获取胰岛素基因。基因表达载体的构建需要限制酶和DNA连接酶，其组成除目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等。(2)要检测目的基因(胰岛素基因)导入受体细胞后，在草莓细胞中是否成功表达，从分子水平上可以采用的方法是抗原—抗体杂交法。(3)如果只导入一个目的基因，则由于减数分裂过程中等位基因分离，其配子中不一定有目的基因，因此只有一部分草莓花粉细胞中含有胰岛素基因。答案：(1)人工合成法、从基因文库中获取和PCR扩增等限制酶和DNA连接酶终止子(2)抗原—抗体杂交法(3)部分若只导入一个目的基因，则其配子中不一定有目的基因7．如图为体细胞核移植流程图，请回答下列有关问题：(1)欲获得动物的单个细胞，可用________________酶处理动物组织块。

上述过程中，所用的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是________________________________________。(2)上述过程中，所用的去核卵母细胞一般处于________期，对卵母细胞去核时常采用________________的方法。(3)将供体细胞注入去核的卵母细胞后，一般通过__________(物理方法)激活受体细胞，使其完成细胞分裂和发育进程。在培养重组胚胎时，培养液中通常要添加______________等一些天然成分，当胚胎发育到__________阶段时，将胚胎移入代孕牛体内。b胡萝卜素作用解析：(1)常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将动物组织块分散成单个细胞。在核移植过程中，用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，原因是传代10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型。(2)在核移植过程中，作为受体细胞的去核卵母细胞一般处于减数第二次分裂中期。对卵母细胞去核时常采用显微操作的方法。(3)在核移植实验中，激活受体细胞使其完成细胞分裂和发育进程一般采用的物理方法是电脉冲。在培养动物胚胎时，培养液中通常要添加血清等一些天然成分，当胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段时，可将其移入受体。

答案：(1)胰蛋白酶或胶原蛋白传代10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型(2)M(减数第二次分裂中)显微操作(3)电脉冲血清桑椹胚或囊胚8．细胞工程可分为植物细胞工程和动物细胞工程等，请回答下列关于细胞工程的问题：(1)图1所示为植物体细胞杂交的流程。图1中“去壁”要使用的酶是________________；过程常采用的方法有物理法和化学法，物理法包括__________________等；过程和过程分别表示______________。(2)图2所示为制备单克隆抗体的流程。图中“筛选”包括选择培养和抗体阳性检测，其中能在特定的选择培养基中存活的是____________，而抗体阳性检测的目的是________________________________________________。(3)图2中，促进细胞融合的方法中，不同于图1中促进细胞融合所涉及的方法是____________；筛选中的目标细胞还可以注射到小鼠腹腔内增殖，从______________中提取单克隆抗体。与普通抗体相比，单克隆抗体具有____________________________等优点。解析：(1)在进行植物体细胞杂交之前，应先使用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁。