b胡萝卜素作用第课时　基因工程与克隆技术考点一　基因工程1．(3)

(1)图b表示用纤维素酶和果胶酶处理来制备原生质体，原因是植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，纤维素酶和果胶酶可除去细胞壁。(2)图c表示用培养基培养原生质体，培养基中加入了适宜浓度的蔗糖，其主要作用是为原生质体提供碳源、能源和调节渗透压维持原生质体的形态，将其与土壤农杆菌共同培养，使携带目的基因的Ti质粒的T??DNA进入植物细胞，整合到植物细胞的染色体(染色体DNA)上，然后通过离心的方法，除去多余的土壤农杆菌。(3)图e表示将原生质体培养成愈伤组织，然后将其转移到含有一定抗生素的培养基中进行培养(图f)，抗生素的作用是筛选出含目的基因的植物细胞。(4)植物生长调节剂的种类和含量会影响愈伤组织的分化，故将愈伤组织转移培养基继续培养(图g)，同时注意调整植物生长调节剂的种类和含量。答案：(1)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，纤维素酶和果胶酶可除去细胞壁(2)为原生质体提供碳源和能源调节渗透压维持原生质体的形态原生质体(植物细胞)T??DNA染色体(染色体DNA)(3)筛选出含目的基因的植物细胞(4)植物生长调节剂的种类和含量会影响愈伤组织的分化2．科学家将某些诱导基因转入小鼠的纤维母细胞中成功获取诱导干细胞，这类细胞经诱导可分化为肝细胞、神经细胞、上皮细胞等，同时诱导干细胞也为单克隆抗体的制备提供了一条新思路，具体过程如图所示。

请回答下列相关问题：(1)与纤维母细胞相比，诱导干细胞分化程度________。过程②的实质是________________。在培养诱导干细胞时需要无菌、无毒的环境，通常需要在培养液中添加一定量的__________，以防培养过程中的污染；同时为了满足营养需求 ，在人工配制的合成培养基中通常需要加入________等一些天然成分。细胞培养所需要的气体主要是氧气和二氧化碳，二氧化碳的作用是______________。(2)图中的Y细胞通常从小鼠的________(填器官名称)中抽取。③过程如果采用化学试剂诱导融合，则该化学试剂通常是______________。只考虑细胞两两融合，Z细胞的类型有________种，如果Z细胞为X细胞和Y细胞融合后的杂种细胞，则Z细胞的特点是__________________________________。与传统抗体相比，单克隆抗体的优点是____________________________________。解析：(1)诱导干细胞具有分化成多种细胞的能力，分化程度较低，而分化成不同细胞的过程就是基因选择性表达的过程。在培养动物细胞时需要无菌、无毒的环境，通常需要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染；同时为了满足营养需求，在人工配制的合成培养基中通常需要加入血清、血浆等一些天然成分。

细胞培养所需要的气体主要是氧气和二氧化碳，二氧化碳的作用是维持培养液的pH。(2)图中的Y细胞为B淋巴细胞，通常从小鼠的脾脏中抽取。诱导细胞融合的化学试剂通常是聚乙二醇(PEG)。只考虑细胞两两融合，X细胞和Y细胞可形成3种融合细胞，即XX细胞、YY细胞、XY细胞。X细胞和Y细胞融合后的杂种细胞(杂交瘤细胞)的特点是既能大量繁殖，又能产生专一性的抗体。与传统抗体相比，单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高，并可以大量制备。答案：(1)低基因的选择性表达抗生素血清、血浆维持培养液的pH(2)脾脏聚乙二醇(PEG)3既能大量繁殖，又能产生专一性的抗体特异性强、灵敏度高，并可以大量制备关注制备单克隆抗体的两个常考点(1)三种细胞的特点：①免疫后的B淋巴细胞(浆细胞)：能分泌抗体，不能大量增殖。②骨髓瘤细胞：能大量增殖，不能分泌抗体。③杂交瘤细胞：既能分泌抗体，又能大量增殖。(2)两次筛选目的不同：①第1次：获得能分泌抗体的杂种细胞。②第2次：获得能分泌所需特异性抗体的杂交瘤细胞。1．(2016·全国卷Ⅰ)某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。