单细胞蛋白_什么是单细胞蛋白_食用单细胞蛋白(2)

本发明中，所述液态发酵制备得到的发酵产品中粗蛋白含量为55%~66%，8种常见 氨基酸含量均有一定程度的增加，粗纤维含量为4%~5%，均高于国家标准(GB/T 5916-2008) 可见单细胞蛋白富含满足动物营养需求的必须氨基酸，具有较高的营养价值。此外，发酵产 物中黄曲霉毒素仏含量仅为5 yg/kg，远低于国家饲料卫生标准(GB13078-2001)中的50 μ g/kg，因此该发酵产物作为动物饲料具有无害性。

本发明中，由液体发酵制备得到的干物质中粗蛋白含量为45%~66.3%。

本发明中，所采用的发酵真菌为产朊假丝酵母和白地霉 (Geo iricAt® ca/3c/ic/•)，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)。

本发明对发酵所用菌种种类进行了考察，分别进行了单一菌种发酵试验和复合菌 种发酵试验。单一菌种发酵试验分别考察了产朊假丝酵母和白地霉对发酵产物粗蛋白含量 的影响，复合菌种发酵试验分别考察了产朊假丝酵母和白地霉在不同比例下对发酵产物粗 蛋白含量的影响。

本发明以黄酒糟和米浆水为原料，通过加入一定量的氮源制备液态发酵培养基。 将黄酒糟和米浆水在121°C高压灭菌20 min，冷却后按照6%的质量浓度配比混合，并加入总 培养基质量〇. 3%的氮源，充分混匀，得到黄酒糟米浆水液态发酵培养基，所述的氮源为蛋白 胨。

本发明采用混菌液态发酵制备单细胞蛋白。单细胞蛋白将产朊假丝酵母和白地霉菌种按一定 菌种比例分别接入黄酒糟米浆水液态发酵培养基，两种液体菌种的接种总量为液态发酵 培养基的5%_50%，接种完毕后充分混匀，接入空气曝气栗，以1 vvm曝气率，自然pH，30°C， 180 rpm/min水浴摇床培养96 h。单细胞蛋白每隔24 h取10 mL发酵液于12000 rpm/min离心10 min， 上清液用〇 . 45 μπι滤膜过滤，测定⑶D、TN等指标，固体真空冷冻干燥后粉碎测其干物质质 量，并用凯氏定氮仪测其粗蛋白含量。

本发明对液态发酵时的基质固液比进行了考察，分别研究了6% (w/v)、12% (w/ v)、20% (w/v)和25% (w/v) 4种固液比，考虑到发酵基质中干物质相差较大，因此只比较了 粗蛋白含量的变化。结果表示，发酵第3天时，6% (w/v)比例配比的基质合成干物质中粗蛋 白含量最高为50.2%。随着基质质量浓度的增加，发酵第4天时发酵产物粗蛋白含量逐渐下 降，当固液比为6% (w/v)时粗蛋白含量最高为56.33%，其次为12% (w/v)时粗蛋白为 55.61%。因此优选固体黄酒糟与米浆水混合基质质量浓度为6%(w/v)。

本发明对单菌发酵效果和复合菌种比例进行了考察，分别对7种不同接种比例(产 朊假丝酵母：白地霉)进行了对比（1 :〇、〇: 1、1:1、1:2、2:1、1:3、3:1)，分析了其对干物质的 产率和粗蛋白含量的影响。结果表明，对于不同的接种比例，发酵4天后酒糟中的干物质的 含量均有相应的提高，其中接种比例为1:1和3:1时，干物质的产率最大分别为3.91和3.86， 结果表明酵母菌为单细胞蛋白合成的优势菌种，当其占较大比例时，更有利于单细胞蛋白 的形成。第4天时接种比例为1:1时，得到的单细胞蛋白的蛋白含量最高为68.08%，其次是3: 1和1:0分别为65.53%和65.25%，进一步说明了产朊假丝酵母菌体是单细胞蛋白的主要成 分，但同时需要一定比例的白地霉帮助其降解黄酒糟中纤维素，两者协同作用能够使单细 胞蛋白合成效果最佳。

本发明对菌种的接种量进行了考察，按照1:1的接种比例分别选取了5% (v/v)、 10% (v/v)、20% (v/v)、50% (v/v)和100% (v/v)五种接种量进行研究，结果表明当接种量 为5%时，单细胞蛋白的产率为3.20，粗蛋白含量为60.23%，而当接种量增加至10%时产率和 粗蛋白含量则分别提高至4.08和68.87%，但当接种量增加至20%和50%时，产率下降为3.11 和3.48,粗蛋白含量和呈明显下降趋势。但当接种量继续增加至100%，产率和蛋白含量相较 50%有一定增加。考虑到经济成本因素，优选单细胞蛋白合成的最优接种量为10%。