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沙门氏菌用什么培养基_显色培养基_沙门在显色培养基

2017-01-30 20:00 网络整理 教案网

在培养基中加有某些特定的显色底物,假丝酵母在生长过程中产生特异性的酶,作用于培养基中的底物,通过生化反应产生不同的显色基团,使生长的菌落表现出特定的颜色。从而达到推测性鉴别、鉴定假丝酵母菌的作用。

【储存条件及有效期】

2~8℃、干燥、避光储存;有效期120天,具体详见产品包装上所示。对于其琼脂平板,打开内包装后有效期为5天。

【样本要求】

纯化菌落,应符合目标菌的菌落特征、镜下特征及其它生化特征。

【检验方法】

1.取一冷藏培养基,若有较多冷凝水应轻轻倒掉多余水分,正面放置于35±2℃孵箱,将皿盖挪开1/3,放置10~20分钟,使其恢复至室温并使表面冷凝水干掉;

2.检查产品是否有被污染(肉眼对光检测琼脂上是否有细菌生长菌落);

3.根据需要划线接种标本或菌株至培养基上;

4.A型:35±2℃,大气环境,孵育36~48小时看结果。请勿孵育在补充了二氧化碳的环境中。B型:30±1℃,孵育24、48和72小时。

【阳性判断值或者参考区间】

判读前先挑取可疑显色菌落于镜下观察确认是酵母菌后,再按下表判读:

产品类型 初步鉴别假丝酵母 菌落颜色

A型 白色假丝酵母 生长;绿色

热带假丝酵母 生长;蓝色,有或无白边

克柔假丝酵母 生长;玫瑰红至淡紫色,带白边,有绒毛

B型 热带假丝酵母 深蓝色

白色假丝酵母

都柏林假丝酵母 绿色**

克柔假丝酵母 粉红色至褐色,干燥,不规则

光滑假丝酵母

乳酒假丝酵母

近平滑假丝酵母

葡萄牙假丝酵母 米黄色/黄色/褐色*

注:如果菌落颜色不明显,继续孵育24小时再看结果。

【检验结果的解释】

A型:

经过适当的培养,在白色背景下观察。接种含有酵母菌的标本,平板上会显示酵母生长。因酵母菌种类的不同,其菌落会显示不同的颜色:光照下显示绿色(白色假丝酵母),带有白边的淡紫色至紫色的扁平菌落(克柔假丝酵母),或深蓝色至金属蓝(热带假丝酵母)。菌落显深紫色或天然奶油色时应该用标准方法予以鉴定。

对这3种假丝酵母,其鉴定只是推定性的,推荐再做确认实验。

B型:

**白色假丝酵母和都柏林假丝酵母显示的绿色同热带假丝酵母显示的深蓝色一样都是由相同的显色底物反应引起的。但是在培养基中还有其它的反应导致菌落产生绿色。

*光滑假丝酵母、乳酒假丝酵母、近平滑假丝酵母、葡萄牙假丝酵母的菌落会出现不同的颜色(米黄色/褐色/黄色),这是由于其本身所产色素和一些碱性磷酸酶活性的影响造成。经验丰富者能够通过菌落的颜色和型态识别这些种类。

经过适当的培养,观察。接种含有酵母菌的标本,平板上会显示酵母生长。因酵母菌种类的不同,其菌落会显示不同的颜色:光照下显示深蓝色(热带假丝酵母),绿色(白色假丝酵母,都柏林假丝酵母),或粉红色至褐色、干燥、不规则(克柔假丝酵母),米黄色/黄色/褐色(光滑假丝酵母、乳酒假丝酵母、近平滑假丝酵母、葡萄牙假丝酵母)。菌落显色不确定时应该用标准方法予以鉴定。显色培养基

对这几种假丝酵母,其鉴定只是推定性的,推荐再做确认实验。

【检验方法的局限性】

由于霉菌和丝状真菌在念珠菌显色琼脂培养基上新陈代谢作用于显色底物,其所显示的颜色可能不同于沙包弱葡萄糖琼脂上所显示的颜色。请勿于传统的外观鉴别描述混淆。光滑假丝酵母和近平滑假丝酵母不能使用该培养基予以鉴别。对这些菌株的鉴定应该采用其它标准的实验室方法予以确认。

有报道称,初代分离时,都柏林假丝酵母在念珠菌显色琼脂培养基上菌落显示出一种特别的深绿色,然后这种特性在传代后消失。必要时可另外做一些表型和基因型的分析。都柏林假丝酵母的临床价值需要进一步研究。

【产品性能指标】

表1性能指标

名称 产品类型 孵育条件 孵育时间 质控菌株(ATCC号) 预期结果