氯化血红素_氯化血红素多钱_乳酸亚铁与氯化血红素

专利名称:氯化血红素的分离和纯化的制作方法

本发明是关于用催化结晶法从水溶液或悬浮液中分离和纯化氧化血红素的方法。而将氯化血红素从水溶液中结晶析出通常是不可能的。

在传统的方法中，只能用数量上大到不相称的大量有机溶剂将氯化血红素从血液或血红蛋白中分离出来。这些溶剂已经成为工业生产中费用最高的因素，并且引起环境污染问题。

早在1853年，Teichmann用冰醋酸在氯化钠存在下作用于血液，得到了以他名字命名的氯化血红素结晶。后来Schalfejew将这个血液显微检测方法发展成为一种生产工艺，至今仍然是传统的制备氯化血红素的方法(Ullmann，应用技术化学大全(Encyklopaedie d.tech.Chemie)，第Ⅳ版，11卷，129页)。在该工艺中，制备1公斤氯化血红素大约需要800升冰醋酸，此外重结晶还需要5升吡啶，11升氯仿和70升冰醋酸。纯氯化血红素的产量只有理论产量的70%。仅在重结晶过程中，就损失约20%。

其它已知的方法是利用甲醇(欧洲专利-B-68537)、乙醇、必要时加入乙二醇或丙三醇的混合物(丹麦专利-A2526596)、二甲基甲酰胺、甲乙酮或丙酮(生理化学进展80(1912)，35)在酸化的血红蛋白中分离氯化血红素和珠蛋白。1公斤氯化血红素需要200至500升上述有机溶剂，得到的还是杂质很多的氯化血红素。

根据美国专利4，330，463，在血红蛋白中加入盐酸，将混合物喷雾干燥，得到的酸性干血用乙醇/甲醇混合物提取若干次，将氯化血红素提入溶液。用这个方法每公斤氯化血红素需要1000升以上溶剂。

本发明的目的就是提供一个分离和纯化氯化血红素的方法，该方法不用有机溶剂，并以很高的收率获得纯的氯化血红素。

我们发现，用本权利要求

的方法可以达到这个目的。用本方法，在PH0.5-2.5时，借助于阳离子的、非离子的或两性的表面活性剂或这些表面活性剂的混合物，将它们作为催化剂，氯化血红素可以从含有氯化物的水溶液或悬浮液中结晶出来。

一般地说，氯化血红素得自血红蛋白，血红蛋白得自血液。加入催化剂后，由于氯化血红素的结晶析出，使血红蛋白分解成氯化血红素和珠蛋白的平衡向氯化血红素移动(因而防止了逆反应的发生)。因此，所涉及的方法主要是氯化血红素从血红蛋白和珠蛋白混合物中的结晶和分离。

如果将含有盐酸的稀血红蛋白溶液加热，立即分出粘稠的沉淀，该沉淀由变性的珠蛋白混合物组成，即已成为不溶的珠蛋白和血红蛋白。我们已经发现，在这个处理过程中，将适当的表面活性剂作为催化剂加入，血红蛋白不会沉淀。而且，出人意外地，以实际上定量的产率形成Teichmann氯化血红素结晶。一经静置，结晶就沉淀下来。无色的上层清液由含有盐酸的纯珠蛋白溶液组成。尽管更可取的是在水解前将血红蛋白溶液稀释至含有2-8%固体含量(尤其是5%左右)，但这不是绝对必需的。水解以及氯化血红素的结晶在浓溶液中也能发生(如固体含量为15%时)，但是反应速度较高，也就是说，如果这样做，氯化血红素的分离时间就会变得很短，以致结晶很小，沉淀很慢。但另一方面，用很稀的溶液是不经济的。

合适的催化剂是前面所述的表面活性剂，即具有疏水和亲水基团的表面作用的混合物，阴离子表面活性剂以不同的方式作用。原则上，市场上许多类型表面活性剂都能被使用，在应用非离子表面活性剂时，最好使用分子量大的表面活性剂。为了促进表面活性剂和珠蛋白分离(在氯化血红素结晶分离后，珠蛋白很容易经中和从母液中沉淀出来)，合理的做法是采用这样的表面活性剂，这些表面活性剂即使在中性PH时仍然留在溶液中。

合适的阳离子表面活性剂的例子是分子中带有一个或二个长链烷基的季铵盐。特别重要的典型化合物的例子是氯化二甲基-C8-C18-烷基-苄基铵，例如氯化苄基十二烷基二甲铵、氯化十八烷基三甲铵、氯化苄基三甲铵、氯化苄基十四烷基二甲铵、氯化十六烷基吡啶鎓以及氯化二羟乙基甲基油酰铵。其它例子是具有羟聚醚基团的羟基脂肪胺，例如十八烷基二乙醇胺或十二烷基二聚乙二醇胺，还有氮杂环丙烷和脂肪胺盐的加成物，2-(脂肪烷基)咪唑啉、2-(脂肪烷基)苯并咪唑和三乙醇胺的脂肪酸单酯。