细胞因子的作用特点_细胞因子风暴实体瘤_细胞因子风暴的原因(2)

7、用类T-细胞受体抗体有望将细胞免疫治疗拓展到实体瘤中

传统上，大量存在于肿瘤细胞内的特异抗原由于不在细胞表面表达，是抗体攻击的禁区。然而如第一个示意图所标示的，细胞内抗原可以经由细胞内特殊的酶切成很短的、但是具的有免疫源性多肽，被主要组织相容性复合体（MHC）提呈到细胞表面。这种被提呈到细胞表面的抗原多肽-MHC复合体，可以成为单克隆抗体的免疫识别靶点。

以此为靶点而制备的单克隆抗体，因为识别的是多肽/MHC复合体，很像T-细胞受体，所以也被叫做类T-细胞受体抗体（TCR-like antibody）。利用这种抗体修饰的T-细胞，可能将细胞免疫治疗拓展到更多的实体瘤中，而且大大减少了对正常组织攻击的可能。

8、抗原肽/MHC抗体修饰的T-细胞对细胞因子释放的影响

一个实例是Eureka 针对肝癌研发的AFP/MHC-CART，代号为ET-1402L1-CART。它所攻击的靶点是被MHC提呈到细胞表面的甲胎蛋白（AFP）抗原多肽，也就是AFP和MHC的复合体。甲胎蛋白是“古老的”肝癌标记物，很早就被作为肝癌的诊断和预后的指标。它在胚胎发育时水平较高，出生后迅速回落消失。肝癌时在肝癌细胞中重新表达，而多数情况下在正常组织中不表达。妊娠、乙型肝炎期间，肝脏损伤修复过程中会有低表达。

可以看到，单次瘤内注射AFP-CART 可以显著抑制肿瘤的生长。在其它试验中通过静脉给药或腹腔内给药，都可以观察到显著的肿瘤抑制。为了检测治疗后动物体内的细胞因子水平，我们在试验结束前，进行了第二次给药，并在给药后采血检测细胞因子水平。如图中所显示，AFP-CART给药后IL-2的水平极低，在单位数 pg/ML 水平。hIFNg 在第二天有所升高，但也在<30pg/mL。IL-6 与对照组比较没有变化，在50 pg/mL的范围。这个细胞因子的水平都处在临床CART实验中的基线以下，也比类似动物试验的水平低很多。

另外一个衡量细胞因子风暴的指标是全身的健康状况。体重是衡量的标准之一。在这个实验里，我们也没有观察到体重减轻，小鼠毛色、活动和进食情况的改变。这个结果说明在有形成细胞因子风暴的环境下,包括长大的携带抗原的肿瘤，激活的CART细胞，宿主的单核和巨噬细胞等，Eureka的AFP/MHC-CART在抑制肿瘤生长的同时，没有造成显著的治疗相关的细胞因子生成和代表不良反应的临床体征。

9、AFP/MHC-CART低细胞因子释放的原因

对于AFP/MHC-CART没有诱发细胞因子风暴的原因，目前还没有直接的证据。我们的假设是与免疫靶点的密度相关。我们的肝癌模型细胞上提呈到细胞膜表面的AFP/MHC 复合体的密度很低，每个细胞也就只有几十个。这远远低于细胞膜表面抗原的密度。比如CD19在不同的B-肿瘤细胞的密度至少要高出2000倍以上。这种极低的抗原密度有可能延缓CART细胞在短时间内同步被激活并释放细胞因子。细胞因子风暴的原因再加上免疫细胞进入实体瘤需要通过多个生物学屏障。是一个相对较长的过程，近一步延缓了CART的瞬间激活。

这个实验有两个意义：

第一是验证了通过CART攻击被提呈到细胞表面的细胞内抗原肽和MHC复合体，可以有效杀伤实体肿瘤。这为将来对众多实体肿瘤的免疫细胞治疗提供了依据。

第二是这种形式的治疗在临床前的模型中非常安全，包括细胞因子释放的水平，都在生理上的安全的范围。

10、关于Eureka ARTEMIS

第二个实例是Eureka ARTEMIS T-细胞。ARTEMIS 是Antibody Redirected T-Cells with Eureka’s Modular Immune Signaling的简称，EUREKA利用自己制备的全人源的抗CD19单克隆抗体修饰T-细胞，制成EurekaCD19-ARTEMIS，并与传统的CD19-CART进行了头对头的药效和安全测试。