改良法制作兔VX2骨肿瘤模型实验研究.doc

7-2as 开始岛屿第一个高挂位置桔子下方右侧约1人处有蛋.a2 第一个小猪.注意碰撞位置.a3 第一个草莓下方右侧约1人处有蛋.ag牌岸边处有蛋.7-3as 中途短崖处有蛋.a2第三个平台上天.a4 第一个连续平台可以在第二个平台等蝙蝠飞过之后再跳过去.在第三个平台先打死乌鸦再跳.落地之后马上消灭青蛙.a4 第二个连续平台的第一个平台蝙蝠的行进会碰到名人.之后在平台上不要急于前进.先站稳打掉蝙蝠.7-4a3牌前火堆前的蛋是饿鬼.a3中第三只小猪a4三堆火右侧有蛋.第八关8-1 荒野as 第二只青蛙右侧约1人处有蛋.a2连续下降阶段最后下陷部分有蛋.a3牌右侧台阶左侧约3人处有蛋.a3连续下降凸凹阶段部分有两个连续碎石第二个碎石.同样注意碰撞的方向.a3连续下降阶段中途可上天.a3区第二个可见蛋是饿鬼.a4第一个可见蛋是奶瓶.第二个可见蛋是饿鬼.8-2 岛屿a3前树左侧约距3人处有蛋.a3 第二个岛屿右侧离岸边距约3人处有蛋.a4 第一树右侧约距5人处有蛋.8-3 洞窟as 第二颗蛋是饿鬼.a3 连续平台上岸边处有蛋.a4 上升阶段要注意滚石.后面连续坠落平台要加足速度,尽量在空中发弹打掉蝙蝠.在第六个平台要提前发弹.打掉蝙蝠.a4 连续坠落平台对岸的一堆火.前面不远就是ag牌.8-4as 第一个蜘蛛左约1人处有蛋.a2 第一个碎石左侧约3人处有蛋.a3 第一个可见蛋是饿鬼.a3 第一个高挂香蕉左侧约2人处有蛋.a4 第一堆火是奖杯boss打法：八个关的boss样子大同小异。12、双螺旋系法：由底部开始，鞋带的左侧（蓝色）端从左侧鞋孔自下而上穿出，同时右侧（黄色）端从右侧鞋孔自上而下穿入。1. 由底部开始，鞋带的左侧端从左侧鞋孔自下而上穿出，同时右侧端从右侧鞋孔自上而。

VX2肿瘤一种可移植的恶性乳头状瘤，可移植在兔的肝脏，肺脏，骨骼肌肌肉等处，所建立的肿瘤模型具有较高的生物学特性[1～3]。由于VX2肿瘤对兔骨质的侵犯及破坏作用与人类骨肿瘤较为类似，兔VX2骨肿瘤的研究备受学者青睐。良好的兔骨肿瘤模型是实验研究成功的第一步，然而造模过程中经常遇到肿瘤细胞经骨孔外渗等困难。本实验中，通过改良法与传统法植入肿瘤细胞制造兔骨肿瘤模型对比，明确改良法可改善肿瘤细胞经骨孔外渗情况。 1 资料与方法 1.1实验动物 新西兰成年家兔22只，月龄4个月，体质量2～3kg，雌雄不限，所有动物进行标准兔舍圈养，卫生水及标准兔饲料喂养。本实验遵循承德医学院实验动物保护及使用规定，遵循医学伦理学要求。 1.2实验器材及仪器 超声诊断扫描仪采用Medical Systems-LOGIQ9（GE公司，美国）；OLYMPUS-BX53光学显微镜（OLYMPUS公司，日本）；VX2肿瘤株由广州吉妮欧生物试剂公司提供。 1.3兔VX2肌肉肿瘤模型制备 1.3.1肿瘤细胞悬液及瘤块组织制备 取传代荷瘤VX2种兔1只，经耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠（1ml/kg）麻醉后，瘤区去毛俯卧位保定于操作台上，剪开皮肤，分离皮下组织、肿瘤，将肿瘤完整取出；将肿瘤置于37℃磷酸盐缓冲液（PBS）中，仔细分离肿瘤组织，去除坏死及周围纤维组织；无菌条件下将肿瘤组织剪成1mm×1mm×1mm大小的组织块，以上操作均于超净工作台内完成。

口腔检查发现穿髓孔较小，x线片示无根折，根尖孔未完全形成，治疗首选直接盖髓术。daculsi制备了一种可注射的磷酸钙骨水泥，将其植入兔子的骨缺损后，虽然其机械强度较低，但能够很快的被吸收，并被新骨替代，可以作为新的骨修复材料用于口腔科、整形外科等。大家都知道髓在机体内的重要，髓盈则骨壮，髓竭则骨枯，脑为髓之海，髓充足则脑健壮，髓藏于骨内，少有活动之机会，易髓大法就是关节螺旋运动中的整体骨架运动，带动周身气血沿正确的轨迹运行，使全身关节无一处不旋转，无一处得不到洗刷之机会，并利用特殊的呼吸秘法，调动腹腔内的细胞开合运动产生能量，并源源不断地向大脑补充。

12、双螺旋系法：由底部开始，鞋带的左侧（蓝色）端从左侧鞋孔自下而上穿出，同时右侧（黄色）端从右侧鞋孔自上而下穿入。1. 由底部开始，鞋带的左侧端从左侧鞋孔自下而上穿出，同时右侧端从右侧鞋孔自上而。左侧（蓝色）端穿入右侧第二排鞋孔，同时右侧（黄色）端自下而上从左侧第二排鞋孔穿出。

兔VX2肿瘤是由Shope病毒在兔皮肤上诱发乳头状瘤衍生的鳞状细胞癌，经历72次传代培养后仍可种植于家兔体内的肿瘤细胞株，具有生长迅速、容易移植、侵袭性强、造模成功率高等优点[5，6]。新西兰种属兔缺乏针对该肿瘤抗体，VX2肿瘤细胞可接种在兔的肝脏、肺脏，大脑，肌肉及骨骼等处，所建立的肿瘤模型具有较高的生物学特性[7～9]。由于VX2肿瘤对兔骨质的侵犯及破坏作用与人类骨肿瘤较为类似，许多学者应用其模仿人转移性骨肿瘤来研究[10]。 目前VX2肿瘤模型制作常用两种方法，一种方法是将肿瘤组织经过离心、细胞计数等制作成肿瘤细胞悬液，注入需要相应器官或组织内。另一种方法是将肿瘤组织碎块剪成碎块，然后通过外科手术方式植入相应器官或组织内。在制作VX2肝癌模型中，有研究[11]认为组织块包埋组制作的肝癌肿瘤模型较细胞悬液相比具有肿瘤形状规则，生长较均一等优点，但在骨VX2肿瘤模型制造中，肿瘤组织块植入法制作骨肿瘤模型应用较为广泛。由于胫骨髓腔内压力与外界不同及髓内出血等因素，当肿瘤组织植入髓内时易被溢出而污染骨孔周围软组织，导致实验失败，而本实验目的在于应用一种新的方法来将肿瘤组织植入骨孔内，避免或改善肿瘤细胞经骨孔外渗情况，从而避免骨孔周围软组织污染。

本实验将VX2肿瘤组织分别在无菌条件下制成肿瘤组织碎块，并将其通过外科手术方式分别植入22只新西兰大白兔双侧胫骨髓腔内。左侧胫骨在植入肿瘤组织块时，先将自制的管径略小于骨孔的金属套管插入骨孔内，在将肿瘤组织碎通过套管植入家兔胫骨髓腔内，然后拔除套管，用骨蜡给予骨孔封堵。右侧组应用无菌镊夹持少许肿瘤组织块直接经骨孔植入胫骨髓腔内。改良法的优点在于应用金属套管插入骨孔的同时，对骨孔产生了物理隔离，在肿瘤组织块植入过程中，避免肿瘤组织被髓内血液溢出或残余肿瘤组织留在骨孔外而污染骨孔周围软组织的可能。而建模后14d的病理检查也验证这一结论，建模后14d取骨孔周围软组织，行病理检查示改良法植入组有5例发现骨孔周围软组织有肿瘤细胞浸润，而传统法组发现有12例。发现肿瘤细胞浸润的软组织显微镜下可见瘤细胞呈圆形或不规则形，核大深染，核分裂像多见，细胞排列紊乱，细胞间质少。对两组骨孔肿瘤细胞外渗率进行χ2检验，差异具有统计学意义，说明改良法植入肿瘤组织块制作骨肿瘤模型可明显改善肿瘤细胞外渗情况。 同时，改良法植入肿瘤组织块制作VX2骨肿瘤模型操作较为简单vx2肿瘤是什么肿瘤，具备一般外科基本操作技能即可完成，是一种理想的VX2骨肿瘤模型制作方法。

介入医学科主任张应战介绍vx2肿瘤是什么肿瘤，介入医学是运用超声、放射、ct、mri(核磁共振)等影像引导下，利用微创外科的技术和导管、导丝、穿刺针等器械，完成穿刺活检，宫腔成形术，局部药物灌注，栓塞治疗，放射与高低温及化学组织消融治疗、内置物等各种技术方式来诊断和治疗疾病的方法。包括： 临床诊断学 实验诊断学.影像诊断学+ 放射诊断学+ 超声诊断学+ 核医诊断学* 临床治疗学 职能治疗学 化学治疗学 生物治疗学 血液治疗学 组织器官治疗学 饮食治疗学 物理治疗学 语言治疗学 心理治疗学内科学 外科学 泌尿科学 妇产科学 儿科学 老年医学 眼科学 耳鼻喉科学 口腔医学 传染病学 皮肤医学 神经医学 精神病学 肿瘤医学 急诊医学 麻醉学 护理学家庭医学 性医学 临终关怀学 康复医学 保健医学 听力学。 100202儿科学（学术型）105102儿科学（专业型） （8303）（8373） 方向：01儿科学导师：杨作成、赵玲玲、黑明燕 ①1881英语②2652病理生理学③3832儿科学 100203老年医学（学术型） （8310） 方向：01老年病遗传学导师：张灼华 ①1881英语②2652病理生理学③3925老年医学 100204神经病学（学术型）105104神经病学（专业型） （8304）（8374） 方向：01神经病学导师：宋治、邓昊、张如旭 ①1881英语②2654神经解剖学③3839神经病学 邓昊、张如旭教授仅招学术型 100207影像医学与核医学（学术型）105107影像医学与核医学（专业型） （8305）（8375） 方向：01放射导师：王维方向：02 b超导师：周平 ①1881英语②2252分子生物学或2656局部解剖学或2657病理学或2658人体解剖学③3833影像医学 报王维选2252或2656。