血清蛋白价格 小而密低密度脂蛋白检测方法及应用进展(2)

分离与检测LDL亚组分的其他方法还包括离子淌度分析法、动态光散射技术、质子核磁共振光谱法等，但上述方法必须采用离子淌度光谱仪、粒度分析仪等特殊仪器设备，需要高度专业化技术的分析，并不适用于大批量样本的临床常规检测。

二、LDL亚组分的检测新方法

Lipoprint LDL亚组分快速分析系统是目前唯一由美国食品药品监督管理局认证的用于LDL亚组分分离检测的诊断设备。Lipoprint检测系统是根据LDL的颗粒大小和电荷的多少，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法来达到分离的目的，可在短时间内将LDL分成7个亚组分，其中组分1和2定义为ldLDL颗粒；组分3至7定义为sdLDL颗粒。该系统可高效地定量、定性检测LDL各亚组分，因而，更有利于在临床常规实验室中的普及应用[10]。血清蛋白价格研究表明，在冠心病患者血浆中，代表sdLDL颗粒的LDL组分3的水平及其百分比显著高于对照者；在具有相近LDL水平的不同冠心病患者中，血浆LDL以组分3为主的患者，其预后较差，更易发生不良心血管事件[11]。可见，对LDL亚组分水平的全面分析相较传统的单纯以LDL或LDL－C为检测目的的血脂分析，更能反映ASCVD患者体内致AS脂蛋白的真实水平，有望为临床ASCVD的危险评估提供更有价值的参考指标。

此外，国外生物公司也推出了采用酶联免疫吸附试验竞争法检测人血清或血浆sdLDL的商品化试剂盒[12]；该方法虽然有望实现sdLDL的快速检测，但是针对人sdLDL的特异性抗体并不能完全排除存在其他交叉反应的可能，且抗人sdLDL抗体的制备方法及其特异性位点仍需进一步验证，该法与其他传统sdLDL分离检测方法的相关性也需进一步评估；是否可应用于临床仍有待考证。

三、sdLDL－C检测技术的发展

sdLDL－C的非匀相测定法主要包括肝素镁沉淀法和肝素锰沉淀法，原理是通过选择性沉淀lbLDL、中间密度脂蛋白和极低密度脂蛋白，收集含sdLDL和高密度脂蛋白的上清液，再测定上清液中LDL－C含量，从而实现对sdLDL－C的定量检测。该方法不需特殊仪器设备，较LDL亚组分传统检测方法简便；但存在预先沉淀处理容易产生不完全沉淀的缺点[13]，易造成最终测定结果的不准确；且不适用于全自动生化分析仪，因此，研发一种完全自动化的sdLDL－C检测方法成为近年来LDL亚组分研究的热点之一。

sdLDL－C的匀相法检测技术实现了对样品的直接测定，满足了全自动生化分析仪对样品检测的要求。Ito等[14]发现，聚氧乙烯苄基苯基醚衍生物可选择性地与富含三酰甘油脂蛋白和HDL反应，而神经鞘磷脂酶可与lbLDL反应，由此产生的胆固醇酯可进一步与胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶和氧化氢酶分解；聚氧乙烯苯乙烯苯基醚衍生物则可保护sdLDL不与上述酶类反应，并选择性地被聚氧乙烯烷基醚分解，产生的胆固醇酯与胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶反应。利用这一原理，2011年日本电化生研株式会社研制出sdLDL－C直接测定法的商品化试剂盒，实现了临床sdLDL－C检测的完全自动化，成为目前最简便、快速的人血清或血浆sdLDL－C检测方法；且该法与LDL亚组分传统检测方法具有良好的相关性，准确度高、稳定性强，从而为临床sdLDL－C检测的推广与应用提供了基石。

2016年，国内生物公司也正式取得过氧化物酶法sdLDL－C测定试剂盒的注册证，该产品也是国内首个适用于全自动生化分析仪测定人血清或血浆中sdLDL－C水平的产品。由此，sdLDL－C的检测将进一步在临床被推广与应用，有望带动ASCVD防控和危险评估领域的新发展。

四、sdLDL－C检测的临床应用