氯化血红素_氯化血红素多钱_乳酸亚铁与氯化血红素(2)

合适的非离子表面活性剂的例子是天然的和合成的9个碳或更多碳原子脂肪醇的乙氧化物。在这种情况下，非离子表面活性剂最好是具有9到50个乙氧基或丙氧基、尤其是按C9到C11、C12到C15和C16到C20部分的氧乙醇。烷基酚也是有用的，尤其是具有8到50个乙氧基和/或丙氧基的辛基、壬基或十二烷基酚的衍生物。具有8到50个乙氧基的脂肪酸和烷醇胺缩合物的衍生物也是有用的表面活性剂。其它合适的非离子表面活性剂有已知的分子量为500到2，500的环氧乙烷和1，2-环氧丙烷的聚合物，分子量为500到8，500的环氧乙烷和1，2-环氧丙烷的嵌段共聚物。

合适的两性表面活性剂是种类繁多的内铵盐，要求它们有长链的疏水基团，如十四烷基内铵盐或磺基牛磺酸基的化合物。

不同的表面活性剂或表面活性剂类型也可混合使用。表面活性剂可在变化很大的浓度范围使用，根据所用的溶液或悬浮液，以重量计其浓度范围从0.005至20%，最好是0.01至5%，最常用的是0.025%。氯离子浓度至少必须足以生成氯化血红素，实际上(更有利地)高于这个限度。这里没有明确地规定上限。

如果加热反应混合物时间长于氯化血红素结晶所需要的时间，即使混合物中有表面活性剂，也会离析出变性的珠蛋白。由于这样做会生成不溶的氯化血红素和珠蛋白的混合物，所以，这种情况是不希望发生的。对于更大的规模，加热和冷却都需要更长的时间，因此，最好采用连续的方法，这样，加热的时间较短。为了这个目的，将表面活性剂作为催化剂加入反应混合物，用泵输入到热交换器，并在此将反应物迅速加热。如果必要，将反应物送至体积合适的容器，在已达到的反应温度上在反应更长周期，然后送至另一个热交换器迅速冷却。任何介质如热水、甘油，油等都可作为加热介质，但是，最好利用蒸汽，蒸汽在大气压下冷凝成水，以避免使反应的水混合物沸腾，并且使温度正好略低于沸点。在大工厂中，如果采用适当的温度控制，当然也可以利用高于大气压的蒸汽。在90℃-99℃可得到最有利的结果，这是因为珠蛋白变性的竞争性沉淀远低于这个温度。用泵的速度和反应速度配合的方法可以得到最佳控制，这将在实施例2和3中叙述。

加入氯化血红素晶种，不仅可以保证恰当的反应速度，实际上还大量节省了表面活性催化剂(最高达99%)。原则上，没有表面活性催化剂，晶种混悬液也能促使氯化血红素结晶。但是，为了这个目的，必须将结晶速度增加到一定程度，使结晶在珠蛋白变性前完成，也就是需要较大的晶种表面积。例如，这个方法可能要用大量的氯化血红素晶种，即为所得氯化血红素结晶的10-100倍，也可能需要磨得特别细的、平均直径小于1微米的晶种，在这种情况下，得到的所生成的氯化血红素也相应地很细，以致离心分离很困难。由于这个问题，这个方法(没有在这里提出权利要求

)实际上是不重要的，尽管它的优点在于不引入可能污染氯化血红素或珠蛋白的外来物质。虽然本发明所使用的表面活性催化剂是这样一种外来的物质，但是，它能得到很大的氯化血红素结晶，这种结晶能自动地沉淀，不需要离心。并且，由于表面活性剂和珠蛋白不同，在中和珠蛋白盐酸溶液时，表面活性剂仍留在溶液中，它们可以很容易地被除去。用水洗涤，可以除去氯化血红素结晶中的表面活性剂。

表面活性催化剂也适用于氯化血红素粗品的重结晶，并且产物的损耗很小。氯化血红素粗品不仅指实施例2至4的反应产物，而且包括任何其它含有氯化血红素的残留物，例如，在血红蛋白酶法降解(参看实施例8)中的生成物，甚至包括纯氯化血红素。在这种情况下，表面活性剂的浓度选择高一些是有利的。氯化血红素例如，根据溶液的情况，以重量计从0.1至20%，最常用的是5%。溶液中的氯化血红素或沉淀中无定形的氯化血红素可以直接结晶，而结晶氯化血红素必须先溶于氨水中。也可以用任何别的碱来代替氨，尽管这样溶液常常更不稳定。也可以将氯化血红素粗品溶于有机溶剂，如二甲基甲酰胺或二甲亚砜，然后加入含有表面活性剂的水，直至混合物主要以水为溶剂，然后使氯化血红素在混合物中结晶。