体外受精和早期胚胎培养_早期胚胎培养技术_牛的早期胚胎培养到

体外受精与胚胎的早期培养：

1、体外受精的原理：人工模拟体内环境（包括营养、温度、pH等），使初级卵母细胞成熟和获能，最

终完成受精和胚胎保存。

2、体外受精主要操作步骤

（1）卵母细胞的采集和培养：

方法一：对小型动物一般用处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的在体外受精。

方法二：对大型动物是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，在体外经人工培养成熟后，才能与获能的受精（或从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞）

（2） 的采集和获能：在体外受精前，要对进行获能处理。

采集方法：假法、手握法和电刺激法等。

获能方法：培养法和化学法。

（3） 受精：获能的和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。

3、胚胎的早期培养：

（1）培养目的：与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。体外受精和早期胚胎培养

（2）培养液成分：除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。

（3）当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植的时间不同。（牛、羊一般要培育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行移植，小鼠、家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人的体外受精胚胎可在4个细胞阶段移植）。

知识拓展：

1、早期胚胎是指可用于移植的胚胎，在原肠胚之前的囊胚、桑椹胚甚至更早的阶段。

2、受精后形成的受精卵需经早期发育培养，才能完成植入或着床。

3、胚胎早期培养液成分与动物细胞培养液成分基本相同，除无机盐、营养成分和调节物质外，还需要血清、抗生素等，两者都是液体培养基，但植物组织培养为固体培养基，其中加入琼脂，所需植物激素主要是生长素和细胞素两大类。