木瓜蛋白酶可以多吃么_木瓜蛋白酶的提取_木瓜蛋白酶的作用

木瓜蛋白酶的提取、分离纯化及其生物学研究综述及实验方法

13生物技术第二大组第二小组

组员：王玓玥（组长）、王子贺、王思瑶、王宇涛、王守鑫、谭国栋

一、 研究背景：

在经济飞速发展的今天，人们的生活水平已远远不只在于吃饱穿

暖，食品的安全和营养问题受到人们越来越多的关注，绿色健康

的生活也成为大家共同的追求，木瓜蛋白酶以它自身耐热及特殊

结构等特点被广泛的用于食品行业，如何分离纯化得到高纯度低

成本的木瓜蛋白酶则是人们现在研究的重点，本小组便也以此为

研究主题展开实验。

二、 木瓜蛋白酶基本介绍：木瓜蛋白酶，又称木瓜酶，是一

种蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜中含有的一种低特异性蛋白

水解酶，广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内，其中在未

成熟的乳汁中含量最丰富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，

属于巯基蛋白酶，它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等

特点，这种蛋白水解酶，分子量为23406，由一种单肽链组成，

含有212个氨基酸残基。至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性

中心部位，他们分别是Cys25、His159和Asp158，当Cys25被氧

化剂氧化或与金属离子结合时，酶的活力被抑制，而还原剂半胱

氨酸（或亚硫酸盐）或EDTA能恢复酶的活力 木瓜蛋白酶是一种

在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋白质的蛋白酶。它的外观

为白色至浅黄色的粉末，微有吸湿性；木瓜蛋白酶溶于水和甘油，水溶液为无色或淡黄色，有时呈乳白色；几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。木瓜蛋白酶是一种含巯基(-SH)肽链内切酶，具有蛋白酶和酯酶

的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力，但几乎不能分解蛋白胨。木瓜蛋白酶的最适合PH值6～7(一般3～9.5皆可)，在中性或偏酸性时亦有作用，等电点（pI）为8.75；木瓜蛋白酶的最适合温度55～65℃(一般10～85℃皆可)，耐热性强，在90℃时也不会完全失活；受氧化剂抑制，还原性物质激活。 。另外六个半胱氨酸残基形成了三对二硫键,且都不在活性部位。纯木瓜蛋白酶制品可含有：（1）木瓜蛋白酶，分子量21000，约占可溶性蛋白质的10%；（2）木瓜凝乳蛋白酶，分子量26000，约占可溶性蛋白质的45%；（3

）

溶菌酶，分子量25000，约占可溶性蛋白质的20%；及纤维素酶等不同的酶。因此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用，是一类巯基蛋白酶, 广泛地存在于番木瓜的茎叶和果实中, 未成熟的乳汁中含量最高.因其含量高、稳定性好、蛋白水解能力强, 对多种蛋白质均具有很好的降解作用, 目前已被广泛应用于各个行业.在食品中, 木瓜蛋白酶被用于肉类嫩化、啤酒澄清和鱼类加工等工艺中.由于此酶为纯天然产物, 其开发前景广阔.运用蛋白质分离纯化的一般方法可将其制备出来并进行活力鉴定。

三、 木瓜蛋白酶的提取

1、过去的常规提取方法

（1）、烘干法：

在番木瓜浆液中加入保护剂，然后将浆液离心，取上清液放置于鼓风干燥箱中，在55～60℃烘干，粉碎后即得到粗酶制品。乙引等用这种方法所获得的酶得率为23.1%，但此法不利于酶活的保持，其酶活力仅为0.16×105U/g，且产品的纯度较低。

（2）单宁沉淀法：乙引等用单宁沉淀法提取了木瓜蛋白酶。先将番木瓜乳汁离心，于上清液中缓慢加入已溶解的单宁溶液，不断搅拌，使溶液中单宁达到一定浓度。木瓜蛋白酶的提取静置，沉淀单宁-酶复合物，调节pH值，沉淀后进行真空干燥，得到酶制品。结果表明，这种方法生产的酶得率较低，仅有7.3%，但酶活力较高，为3.53×105U/g。但是这种方法存在环境污染等问题。