乳腺生物反应器_膜生物反应器原理_一次性生物反应器

外源基因地乳腺表达需要乳蛋白基因的一个启动子和高控区，即引导泌乳期乳蛋白基因表达的序列。一般应用重组DNA技术和转基因技术，将目的基因转移到尚处于原核阶段（或1-2细胞的受精卵）的动物胚胎中，经胚胎移植，将外源基因置于乳腺特异性调节序列控制之下，使之在乳腺中表达，通过回收乳汁获得表达产物。

有以下特点：

1.表达产物对转基因动物的影响小；

2.表达产物可被充分修饰并具有稳定的生物活性；

3.产品安全可靠，质量高；

4.作为乳腺生物反应器的转基因动物可通过繁殖扩大数量，便于工厂化生产。

乳腺生物反应器的应用主要体现在四个方面：一是建立转基因动物生物反应器模型，如利用转基因小鼠可为基它转基因动物生物反应器的研究和商业开辟道路；二是生产药用珍稀蛋白；三是提高乳汁的营养价值，并降低有达物质的含量，如导入乳铁蛋白基因以提高乳铁蛋白在乳中的含量，导入溶酶基因以降低乳中细菌的含量。四是改变乳汁的组成成分，使其性质更接近人乳，提高乳汁的应用价值。

1.国外应用开发现状：

自80年代末，英国人实现用小鼠乳腺生产人的抗胰蛋白酶以来，国外在此项技术上取得了巨大的发展。目前在小鼠乳腺中可合成数十种产品表明控制外源基因在动物乳腺特异和高效表达技术已日渐成熟。

美国Genzyme Transgene(GTC)与***的Somitomo Metals合作，共同开发其领先产品凝血酶原Ⅲ，在转基因山羊中表达量为4g/l，目前已进入临床试验。美国Genpharm International公司用酪蛋白启动子与人乳铁蛋白（hLF）的cDNA融合，获得世界上第一头名为Herman的转基因公牛，该公牛可与非转基因母牛生产转基因后代，1/4后代母牛乳汁中表达了hLF。1991年，在羊反应器上研究进展最快的英国在转基因羊Polly和其他转基因克隆动物的乳腺表达分泌α-抗胰蛋白酶（aipha-1-antitrypsin），其产量可达35g/l，且性能稳定，并可在后代中稳定遗传。随后Halter等人报道，在转基因羊乳腺中表达因子Ⅷ已获成功。1996年Bleck等从转因基猪的乳汁中获得了WAP。1997年Walliam等在转基因猪的乳汁中提取到人体蛋白C（Hpc），并且这种乳腺反应器生产的hPC具有与人中分离的天然hPC相同的活性。1999年7月21日，英国PPL医疗公司宣布他们用基因打靶技术获得了两只定点整合的转基因羊Cupid和Diana，并已将这一技术用于人类蛋白的开发。

2.国内应用开发现状。

我国对动物乳腺生物反应器的研究起始于国家“七五”计划，目前已获得了转基因小鼠、兔和羊等有快速生长能力或抗病能力的畜种，及乳腺生物反应器表达分泌的具有生物活性的蛋白产物。由于我国在乳腺生物反应器研究上资助力度小，无法进行大规模试验，在外源基因表达水平上同国外相比还存在很大的差距。

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请大家谈谈乳腺生物反应器的方方面面知识和进展，包括：转移载体构建、表达、转基因技术、生产技术环节关键点、优缺点等等。

欢迎各位战友上传高价值原创资料。有关转基因技术的初步认识

转基因动物体系打破了自然情况下的种间隔离，使基因能够在种系关系遥远的机体间流动，且能在异种动物再现基因表达调控的四维特征，远非细胞水平三维的基因表达调控系统所能够比拟的，对整个生命科学产生全局性的影响。

转基因技术的关键主要涉及：对外源程序基因的构建、载体与供体（早期胚胎）制备、基因导入、供转基因胚胎发育的体外培养系统和受体动物的选择等等，以及一些有关转基因是否整合和表达的鉴定技术。其中，最为关键的技术为基因导入。目前，基因导入的方法有基因的显微注射法、染色体片段显微注入法、重组逆转录病毒感染着床前胚胎法、胚胎干细胞介导法、以作为载体的介导法等等。其中使用广泛的仍为基因显微注射法和胚胎干细胞介导法。look this one