常用缓冲液及培养基配方

常用缓冲液及培养基配方 LB 液体培养基： Bacto-蛋白胨 酵母抽提物 氯化钠 加 950ml 蒸馏水溶解， 用 5N 氢氧化钠调 pH 至 7.0， 定容至 1000ml， 高压灭菌后保存。 LB 固体培养基： 每升 LB 液体培养基中加入 12g 琼脂粉， 高压灭菌后保存。 SOB液体培养基 Bacto-蛋白胨 酵母抽提物 NaCl 10g 5g 10g 20g 5g 0.5g 加950 ml水溶解， 加入250mmol/L KCl 溶液10ml， 用5 N NaOH调pH至7.0， 定容至1000 ml， 高压灭菌后保存。 使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。SOC液体培养基 SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L抽提缓冲液。 麦康凯固体培养基 每 1000ml 水中加 52g 培养基粉， 煮沸溶解后分装， 高压灭菌。 NA 固体培养基 牛肉浸膏 酵母浸膏 蛋白胨 蔗糖 琼脂粉 加 950ml 蒸馏水溶解， 调 pH 至 7.0， 定容至 1000ml， 高压灭菌后保存。 TB 培养基 ： 将下列组分溶解在 0.9L 水中： Bacto-蛋白胨 酵母抽提物 甘油 各组分溶解后高压灭菌。

冷却到 60℃ ， 再加 100ml 灭菌的 170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。 高压灭菌或用 0.22um 的滤膜过滤除菌。 溶液Ⅰ 葡萄糖 2.25 g 1mol/L Tris· Cl(pH8.0) 6.25ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 3g 1g 5g 10g 15g 12g 24g 4ml 50mmol/L 20mmol/L 10mmol/L 调pH至8.0后， 用水定容至250 ml， 高压灭菌后保存。 溶液Ⅱ 10 mol/L NaOH 2ml 10% SDS 10ml 用水定容至100 ml， 现配现用。 溶液Ⅲ 5 mol/L 醋酸钾 60ml冰醋酸 水 高压灭菌后保存。 高盐 TE 缓冲液 10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0* 11.5ml 28.5ml 0.1mmol/L EDTA, pH 8.0* 1mol/L NaCl 于室温保存（可在几年内保持稳定） CTAB 抽提液 2%（w/v） CTAB(古立烷基三乙基溴化铵) 100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 * 1.4mol/L NaCl 于室温保存（可在几年内保持稳定） CTAB/NaCl 溶液（10% CTAB/0.7mol/L NaCl） 在 80ml H2O 中溶解 4.1g NaCl,缓慢加入 10 一 CTAB（十六烷基三乙基溴化铵）， 同时加热并搅拌。

sorensen磷酸缓冲液(0.1mol/l,ph5.3-8.04) : 免疫组化 : 4℃,6个月 : 主要由磷酸二氢盐(钠/钾)和磷酸氢二盐(钠/钾)溶液组成,按不同比例混合后获得对用ph值。 3h2o） j) l-酪氨酸（c9h11no3） a1. 4 溶液 a) 磷酸氢二纳溶液（0. 05mol/l） 称取 8. 953g 的磷酸氢二钠， 加适量水溶解后， 置于 500ml 容量瓶， 用水定容至刻度， 摇匀备用。加酚酞指示液2滴，用本液滴定，在接近终点时，应使邻苯二甲酸氢钾完全溶解，滴定至溶液显粉红色。

10% SDS： 10g 十二烷基硫酸钠溶于 90ml 水中， 加热至 68℃溶解， 加几滴浓盐酸调 pH 至 7.2， 定容至 100ml， 过滤除菌。 50×TAE缓冲液 Tris 242 g 冰醋酸 0.5 mol/L EDTA(pH8.0) 57.1 ml 100 ml 用水定容至1000 ml， 用时稀释50倍。 5×TBE 缓冲液：Tris 碱* 硼酸 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 54g 27.5ml 20ml 加水定容至 1000ml， 0.5×使用。 6×DNA 上样缓冲液：0.25%溴酚蓝* 0.25%二甲苯青 FF* 30%甘油 甲醛凝胶加样缓冲液(DEPC 处理水配制)：50%甘油 1mmol/L EDTA(pH8.0) 0.25 溴酚蓝* 0.25 二甲苯青 FF* 适量溴化乙锭* 20× SSC：氯化钠 柠檬酸钠 蒸馏水 溶解后用 5N 氢氧化钠调 pH 至 7.0， 定容至 1000ml， 高压灭菌保存。

预杂交液：6×SSC 5×Denhardt 试剂 0.5% SDS 175.3g 88.2g 900ml 100ug/ml 经变性并断裂成片段的鲑精 DNA 5×甲醛凝胶电泳缓冲液：0.1mol/L MOPS(pH7.0)* 40mmol/L 乙酸钠 5mmol/L EDTA(pH8.0)* 甲醛变性凝胶配方： 加入 0.7 g 琼脂糖到 49.7 ml DEPC-H2O 中， 用煮沸法溶解琼脂糖， 待溶液冷却至 55℃同时加入 7 ml 10×MOPS（0.2 mol/L MOPS pH7.0, 20 m mol/L 乙酸钠， 10 m mol/L EDTA pH8.0） 电泳缓冲液和 13.3 ml 甲醛， 摇匀， 制板待用。 0.5 mol/L 磷酸缓冲液（PH 7.2） 134 g Na2HPO4, 4 ml 85% H3PO4,用水定容至 1L。 探针标记中的逆转录终止液 1×TEN 40 m mol/L Tris-Cl (PH 7.5),1 m mol/L EDTA (PH 8.0),150 m mol/L NaCl。

洗膜液Ⅰ 2×SSC， 0.1％（m/V） SDS 洗膜液Ⅱ 0.1×SSC， 0.1％（m/V） SDS SDS-PAGE 电泳分析所用的试剂： 30%丙烯酰胺： 29g丙烯酰胺和1g N ， N ’ 亚甲基双丙烯酰胺， 加入60ml ddH2O， 完全溶解后定容至100ml， 过滤， 置棕色瓶中备用。 Tris-甘氨酸电泳缓冲液： Tris 3.00g， 甘氨酸14.4g， SDS 1g， 调pH至8.3， 用水定容至1L。 12%分离胶： ddH2O 3.3ml， 30%丙烯酰胺4ml， Tris-HCl （pH8.8） 2.5ml， 10%SDS 0.1ml，10%过硫酸铵0.1ml， TEMED 0.006ml。 5%浓缩胶： ddH2O 1.4ml， 30%丙烯酰胺0.33ml， Tris-HCl（pH6.6） 0.25ml，10%SDS0.02ml， 10%过硫酸铵0.02ml， TEMED 0.002ml。 考马斯亮蓝染色液： 乙醇450ml， 冰醋酸100ml， ddH2O 450ml， 考马斯亮蓝R-250 2.5g。

二、单选题：a c c b d 三、名词解释： 1． 水提醇沉法：系指在中药水提浓缩液中，加入乙醇使达不同含醇量，某些药物成分在醇溶液中溶解度降低析出沉淀，固液分离后使水提液得以精制的方法。稳定性：在通常贮存的条件下稳定.溶于丙酮和甲醇,那么应该溶于大部分的有机溶剂,你可以试试异辛酸（228℃） ,或者是硝基乙烷 114.0 辛烷 125.67 几乎不溶于水,微溶于乙醇,与醚、丙酮、石油醚、苯、氯仿、汽油混溶乙酸丁酯 126.11 优良有机溶剂,广泛应用于医药行业,还可以用做萃取剂氯苯 131.69 能与醇、醚、脂肪烃、芳香烃、和有机氯化物等多种有机溶剂混溶对二甲苯 138.35 不溶于水,与醇、醚和其他有机溶剂混溶二甲苯 138.141.5 不溶于水,与乙醇、乙醚、苯、烃等有机溶剂混溶,乙二醇、甲醇、2-氯乙醇等极性溶剂部分溶解间二甲苯 139.10 不溶于水,与醇、醚、氯仿混溶,室温下溶解乙睛、dmf等醋酸酐 140.0 邻二甲苯 144.41 不溶于水,与乙醇、乙醚、氯仿等混溶环己酮 155.65 与甲醇、乙醇、苯、丙酮、己烷、乙醚、硝基苯、石油脑、二甲苯、乙二醇、乙酸异戊酯、二乙胺及其他多种有机溶剂混溶糠醛 161.8 与醇、醚、氯仿、丙酮、苯等混溶,部分溶解低沸点脂肪烃,无机物一般不溶邻甲酚 190.95 微溶于水,能与乙醇、乙醚、苯、氯仿、乙二醇、甘油等混溶n,n-二甲基苯胺 193 微溶于水,能随水蒸气挥发,与醇、醚、氯仿、苯等混溶,能溶解多种有机物对甲酚 201.88 n-甲基吡咯烷酮 202 硝基苯 210.9 喹啉 237.10 乙二醇碳酸酯 238 二甘醇 244.8。产品描述：干玉米酒糟是以玉米或其他谷物为原材料在发酵制取酒精（乙醇）过程中对糟液进行加工处理后而获得的酒精糟及残液干燥物，无论是否含有可溶性蛋白物质。

Western blot所用试剂： 1×PBS(pH7.4)： NaCl 8 g， KCl 0.2 g， KH2PO4 0.24 g， Na2HPO4 1.44g， 用蒸馏水溶解至1 L 1×PBST： 5L 1×PBS 中加入2.5ml Tween-20 封闭液： 100ml PBS缓冲液中加入5克脱脂奶粉 7.5% 9mol/L植物基本培养基溶液 大量元素（1L） 七水硫酸镁 磷酸二氢钾 硝酸钾 硝酸氨 二水氯化钙 微量元素（1L) 硼酸 一水硫酸锰 七水硫酸锌 二水钼酸钠 五水硫酸铜 六水氯化钴 碘化钾 七水硫酸亚铁 乙二铵二乙酸二钠 有机(1L) 盐酸硫胺素 盐酸吡哆辛 烟酸 肌醇 MSs 培养基 10×大量 100×微量 100×铁盐 500×B5 有机 6-BA 370mg 170mg 1900mg 1650mg 440mg 6.2mg 15.6mg 8.6mg 0.25mg 0.025mg 0.025mg 0.83mg 27.8mg 37.3mg 0.5mg 0.5mg 0.05mg 100mg 100ml 10ml 10ml 2ml 1mg 蔗糖 琼脂 调 PH5.8 并加水定容至 1L Msr（1L） 10×大量元素 100×微量元素 100×Fe 盐 500×B5 有机 蔗糖 葡萄糖 琼脂 PH5.8 加水定容至 1L 30g 0.8% 100ml 10ml 10ml 2ml 3g 7g 0.8%水稻转化用培养基 培养基 成分 NB(基本培养基) (刘巧泉等,1998) Nbi(愈伤诱导和继代培养基) 高渗培养基 NBs(筛选培养基) N6 大量元素营养液、 EDTA-Fe 营养液、 B5 微量元素营养液、 B5维生素营养液 NB、 0.5g/L 谷氨酰胺、 0.5g/L 脯氨酸 、 0.3g/L 水解酪蛋白、 30g/L 蔗糖、 2mg/L 2,4-D、 2.6g/L 植物胶， pH5.8 Nbi、 47g/L 山梨醇、 47g/L 甘露醇， pH5.8 NB、 0.5g/L 谷氨酰胺、 0.5g/L 脯氨酸 、 0.3g/L 水解酪蛋白、 30g/L 蔗糖、 2mg/L 2,4-D、 40mg/L Hyg(第二次筛选用量为 50mg/L)、2.6g/L 植物胶， pH5.8 MS 大量元素营养液、 EDTA-Fe 营养液、 MS 微量元素营养液、B5 维生素营养液、 2g/L 水解酪蛋白、 30g/L 蔗糖、 30g/L 山梨醇、2.0mg/L 6-BA、 0.5mg/L NAA、 30mg/L Hyg、 3.0g/L 植物胶， pH5.8 NB、 2g/L 水解酪蛋白、 30g/L 蔗糖、 30g/L 山梨醇、 2.0mg/L 6-BA、0.5mg/L NAA、 30mg/L Hyg、 3.0g/L 植物胶， pH5.8 1/2MS(生根培养基) 1/2(MS 大量元素营养液+EDTA-Fe营养液+ MS 微量元素营养液)、B5 维生素营养液、 3g/L 蔗糖、 7g/L 葡萄糖、 40mg/L Hyg、 2.6g/L植物胶， pH5.8 MS(再生培养基) NBr(再生培养基) 水稻转化用激素和化合物的配制 (1) 2,4-D(1mg/ml)： 称取 100mg 2,4-D 置于小烧杯内， 加少量无水乙醇使之完全溶解后， 将水缓慢加入不停搅拌的 2,4-D 酒精溶液中， 不可出现沉淀， 定容至 100ml， 过滤除菌。 (2) 6-BA (1mg/ml)： 称取 100mg 6-BA 置于小烧杯内， 加少量 1M KOH 溶解， 慢慢加灭菌蒸馏水至 100ml， 过滤除菌， 4℃保存。 (3)NAA(1mg/ml)： 称取 100mg NAA 置于小烧杯内， 用 1M KOH 溶解， 慢慢加灭菌蒸馏水至 100ml， 过滤除菌， 4℃保存。