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血清蛋白价格由上海斯信生物科技有限公司提供,产品特点:RD-

2018-02-05 19:02 网络整理 教案网

血清蛋白价格_血清蛋白结合率高低_血清蛋白测定偏低

1. RD-ES细胞液体培养基的保存是冷藏好?还是冷冻好?

要冷藏!!因为液体培养基经冷冻后再经溶化时,其溶液的pH值会发生改变,溶液往往变碱,某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中,通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。

2.RD-ES细胞 液体培养基中谷氨酰胺的作用,及使用方法。血清蛋白价格

几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求,细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20 ?C冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ?C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml完全培养基中,其终浓度为2mM/ml培养基。包装为粉红色,-24?C保存。

3. RD-ES细胞 培养用液pH对细胞生长的影响

由于,大多数细胞适宜pH为7.2~7.4,偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不完全相同,原代培养细胞一般对pH变动耐受差,无限细胞系耐受力强。

但总体来说,细胞耐酸性比耐碱性强一些,偏酸环境中更利于细胞生长。因此,我们在配制培养用液时,可把液体的pH稍微调得偏酸一些。血清蛋白价格液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时,溶液的pH还会向上浮动0.2左右。

4.RD-ES细胞 细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗?

不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶,以便于将含血清的培养基冲洗干净,这样就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液浓度为:

(1)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;

(2)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。

(3)0.25% 胰蛋白酶

溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。

多数细胞传代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA这种消化液。

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一、客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;

收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。

二、如为贴壁细胞,请在显微镜下观察细胞密度:

1. 未超过80%汇合度时,用75%酒精(建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水,喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后打开盖子,先用枪头把培养基吸出10ml左右,放在离心管里,然后瓶口过火(严禁直接倾倒),这样可以保证不污染,再用10ml的移液管,将剩余的培液全部吸出,放于离心管中,培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整)之后,传代或者冻存。

2. 超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下:

1) 弃去培养液,用3ml PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次;

2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来;