木瓜蛋白酶配制_什么是木瓜蛋白酶_木瓜蛋白酶危害
木瓜蛋白酶配制
标题: 不同酶消化机制的不同?(酶消化,胰酶,胶原酶,木瓜蛋白酶)
摘要: [不同酶消化机制的不同?(酶消化,胰酶,胶原酶,木瓜蛋白酶)] 请问大家:胰酶,胶原酶以及木瓜蛋白酶的作用机制分别是什么?消化上有何区别? 关键词:[酶消化 胰酶 胶原酶 木瓜蛋白酶 作用机制]……
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请问大家:胰酶,胶原酶以及木瓜蛋白酶的作用机制分别是什么?消化上有何区别?1.胰酶是组织消化中应用最多的酶类。木瓜蛋白酶配制适用于消化细胞间质较少的软组织,如胚胎、上皮、盰、肾等组织,对传代培养细胞的消化也很好。活性可用消化酪蛋白的能力表示,常见有1:125和1:250,即一份胰酶可消化125或250份酪蛋白。组织培养用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%浓度,配制时要用不含Ca2+、Mg2+及血清的平衡盐溶液(如D-Hank"s),因为这些物质会对胰酶产生抑制作用。胰酶作用及溶解的最佳pH是8-9,l理论上配制胰酶溶液应将液体调至pH8左右,充分溶解,过滤除菌分装于4度保存。过滤后可以再调只pH7.5,也可不调。
为了提高消化效果常与EDTA联合应用。
2胶原酶分五型,分别针对不同的组织类型。在上皮类细胞原代培养时经常使用,胶原酶作用的对象是胶原组织,因此不容易对细胞产生损伤。胶原酶的使用浓度为0.1-0.3mg/L或200000U/L,作用的最佳pH为6.5。胶原酶不受Ca2+、Mg2+及血清的抑制,配制时可用PBS。
3.木瓜蛋白酶在细胞培养中的应用我还没听过。只知道它在免疫球蛋白重链间二硫键的N端将其裂解成分子量基本相等的三个片段:2个Fab和1个Fc片段。Fab能够与抗原结合,称为抗原结合片段(Fab),而木瓜蛋白酶酶切法被认为是一种抗体F(ab′)2片段制备的新方法。胶原酶的使用浓度为0.1-0.3mg/L??? 这个有问题的吧
胶原酶的使用浓度为0.1-0.3mg/L??? 这个有问题的吧
以上为我们平时所用浓度,我查了一下司徒镇强的《细胞培养》,他列出的胶原酶用量下限为0.03,上限一样。可以再参考一下其它细胞培养方案.但是0.1-0.3mg/L或200000U/L两个浓度相差好大的啊???
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