核酸分子杂交试题 (全 ,打印)(4)

C. 基因突变分析 D. 限制性片段长度多态性的分析 四. 填空题:

1. 核酸分子杂交中，杂交的双方分别称为 与 。 2. 核酸分子杂交中已知的核酸序列称为 。

3. 适当的电泳缓冲液中，DNA 在电场作用下，由负极向正极泳动，分子越大，泳动速度 。 4. 当促使变性的因素解除后，两条DNA 又通过碱基互补配对结合形成DNA 双螺旋结构，称为 。 5. 在DNA 的碱基组成中，AT 之间是 氢键，GC 之间是 氢键。 6. 鉴别DNA 靶分子的杂交称为 ，鉴别RNA 靶分子的杂交称为 。 7. 根据检测对象的不同，可将原位杂交分为 和 。 8. 常用的液相杂交有 和 。

9．RNA 酶保护分析法（RPA ）的基本程序包括： 、 、 、 、 10. 液相杂交的核酸酶S1保护分析法可用于 、 、和 。 11. 核酸探针包括： 、 、 和 。

12. 在用核酸标记的探针，大多数标记方法需要的是α-32P ，末端标记必须使用 。 13. 核酸的体外标记法分为 和 。

14. 核酸的体外标记法中的酶法最常用的是 和 标记。 五、简答题

1、DNA 变性的常用方法有哪几种？

2、简述DNA 的复性过程。

3、一个良好固相支持物应具备哪些特性？

4、试比较硝酸纤维素膜、尼龙膜和化学活化膜的优缺点。

5、核酸原位杂交的理想固定液应具备哪些特点？

6、一种理想标记物应具备哪些特性？

。

7、随机引物法标记DNA 探针有哪些优点？

六、论述题

1、试述核酸分子杂交的原理。

2、试述影响核酸分子杂交的因素。

3、试述Southern 印迹杂交的基本步骤。

4、试述Southern 印迹的常用方法及原理。

5、试述核酸原位杂交的基本过程。

6、试述探针的种类及其制备。

7、试述切口平移法标记DNA 探针的原理。

名词解释： SiRNA:

利用双链小片段RNA 高效、特异性降解细胞内同源mRNA ，从而阻断体内靶基因表达，使细胞出现靶基因缺失的表型。 Blue/white screen:

蓝白斑筛选。即β-半乳糖苷酶基因失活筛选。其原理是：某些质粒载体带有大肠杆菌乳糖操纵子的lacZ ’基因，该基因含一段编码β-半乳糖苷酶氨基末端145个氨基酸α－肽的DNA 片断，IPTG 可诱导此片断合成，此片断能与宿主细胞所编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内α－互补，形成完整的β－半乳糖苷酶。该酶能催化指使剂底物X －gal 形成蓝色菌落。当外源基因插入lacZ ’基因中MCS(多克隆位点) ，lac α－肽基因阅读框架被破坏，细菌内将无β－半乳糖苷酶活性，结果重组克隆呈白色菌落。 Knock down:

可以设想用程序来实现以下功能：在网络正常的时候，牢牢记住正确网关的ip地址和mac地址，并且实时监控着来自全网的arp数据包，当发现有某个arp数据包广播，其ip地址是正确网关的ip地址，但是其mac地址竟然是其它电脑的mac地址的时候，这时，无疑是发生了arp欺骗。3、1996-1999年 参加吴在德教授主持的《肝癌自杀基因治疗及治疗基因体内导入方法的实验研究》，体外实验证实了tk自杀基因杀伤肝癌细胞的有效性，体内实验证实了肝动脉注射加栓塞是体内基因靶向性导入的有效方法 ，以本研究为基础而完成的博士论文获2000年度湖北省优秀博士论文奖。

G 蛋白。是三聚体GTP 结合调节蛋白的简称，位于质膜内胞浆的一侧，由α，β，γ三个亚基组成，βγ二聚体通过共价结合锚定于膜上起稳定α亚基的作用，而α亚基本身具有GTP 酶活性。G 蛋白在信号转导过程中起着分子开关的作用，当G 蛋白α亚基与GDP 结合，处于关闭态；当胞外配体与受体结合形成复合物时，导致受体胞内结构域与α亚基偶连，并促使α亚基结合的GDP 被GTP 交换而被活化，即处于开启状态，从而传递信号。