木瓜蛋白酶_木瓜蛋白酶最佳用量_木瓜蛋白酶 用量(3)
木瓜蛋白酶还可以催化合成多种药物及其前提物质。还可用固定化木瓜蛋白酶催化合成具有生理活性的壳聚糖低聚物,固定化酶可重复利用10次且比游离酶有更好的解聚作用。木瓜蛋白酶可用于肿瘤的辅助治疗。在化疗期间口服木瓜蛋白酶可以降低化疗的副作用而增强化疗的疗效。
提取方法一:干木瓜乳液硅藻土;沙子;0.04mol·L-1半胱氨酸→抽提,过滤粗提取液
NaOH;Ph9→除Ph9不溶物上清液沉淀、离心粗提取液(NH4)2SO{4→沉淀;离心沉淀0.02mol·L-1半胱氨酸;Ph7→溶解溶液NaCl(固体)→沉淀;离心沉淀0.02mol·L-1半胱氨酸;Ph6.5→溶解溶液冷冻、离心、重结晶溶液40→冷冻;离心结晶^H2O;NaCl→重结晶成品
提取方法二 :从未成熟的木瓜果实中提取胶乳,并将其沉降、凝固、干燥即制得产品。
提取方法三 :由木瓜(Caric papaya)的未成熟果实,经提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工业上以粗制品的应用为主。
本方法仅适用于木瓜蛋白酶。
基本原理
木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。
酶活单位
在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。
试液制备
1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.42g,加10mmol/LEDTA、50mmol/L半胱氨酸液2.6mL,加适量水,用0.1mol/L氢氧化钠液调节pH至6.2,最后定容至50.0mL。
2、待测酶液:取试样用水稀释至适当浓度,并调节至pH6.2。
测定方法
25℃ 恒温条件下,取25mL烧杯装在pH自动滴定仪上,加底物溶液3.75mL、3mol/L氯化钠溶液2.50mL、重蒸馏水1.25mL,混合后加入待测 酶液后立即计时,用0.1mol/L氢氧化钠在电磁搅拌下连续滴定以保持pH6.2,记下每分钟所耗0.01mol/L氢氧化钠毫升数。同时进行空白校 正。按下式计算木瓜蛋白酶的活力P(单位/mg)
:P =C·ΔV·1000/W
式中:c:氢氧化钠液的浓度,mol/L;ΔV:每分钟消耗氢氧化钠液的体积减去空白值;W:反应液中木瓜蛋白酶的质量,mg。
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