纪念人工全合成结晶牛胰岛素50周年(3)

改革开放后，作为学术带头人，我有机会参加了国外相关的学术会议，诸如规模最大的美国多肽会议(APS)、欧洲多肽会议(EPS) 与日本多肽会议(JPS)、澳大利亚多肽会议(AuPS)、亚太地区多肽会议及国际多肽会议等。我们不仅从中学到了新思想、新方法，同时也结交了一大批国际同行朋友。

研究生毕业后，第一批被公派到美国休斯顿大学攻读博士，并完成博士后课题研究获得生物化学专业博士后学位。博士后很容易形成误解，就是“博士后是博士以上的学位”。所以说"博士后"其实是一种工作，而拥有"博士"学位是申请成为"博士后"必要条件。

7、提高了科学研究的水平

前体底物法是通过测定蛋白质合成前体—氨基酸合成到蛋白质中的速度，测定蛋白质的合成速度。胰岛素是由两个多肽组成的含锌蛋白质，每个胰岛素分子与2～4个锌原子结合形成复合物，锌有利于胰岛素发挥其生理功能，稳定胰岛素分子活性以及避免受胰岛素酶降解等功能，参与体内碳水化合物代谢。前体底物法通过测定一段时间内标记氨基酸合成到组织蛋白中引起的富集度变化测定组织蛋白的合成速度，此时得到的合成速度一般用每天合成的蛋白质量占该组织蛋白总量的百分比表示（ %/天），称为蛋白质合成比速度（fractional protein synthesis rate, fsr）。

成功合成胰岛素不仅促进了蛋白质晶体结构的研究，还促进了化学与生命科学研究相关领域的发展。比如，胰岛素结构与功能关系的研究，生物活性肽与蛋白质的分离、纯化与结构鉴定，生物活性肽的合成及合成方法学的研究，生物活性肽结构与功能的研究，以及多肽与蛋白质毒素的研究等。

基于这两点判断，我们对市场整体持相对乐观的态度。重要的是，分析科学问题要用科学的态度，既要严谨更要积极，否则不仅不能进步，甚至无法生活。中国首次(世界首次)合成结晶牛胰岛素: 1965年王应睐组织我国科学家首次合成具有全部生物活力的结晶牛胰岛素。

接到任务下达书后，课题组的成员根据学校自身的特点，反复论证，制定了切实可行的课题研究方案，于2006年6月20日隆重召开了课题开题会，市教研院科研处的领导、区教育局局长、进修学校校长、科研室的领导都参加了此次开题会，并对此次会议给予了高度的评价。定期召开教学教研工作会议，汪云副校长作《统一思想，提高认识，通力协作，再创佳绩》的发言，重点从强化科研意识、确立发展目标、坚持研教结合、实施读写工程和着力过程管理等方面加以指导，各教研组长及课题负责人交流新学年教研、课题研究的工作思路及活动安排。一学期来，我们数学教研组的全体教师以整体推进素质教育为目标，以课程改革为中心，以课堂教学改革为重点，认真落实“科研兴教、科研强师、科研兴校”方法，深入开展教学研究，并在学校领导的大力支持和帮忙下，我们加强教研力度，采取课题牵动策略。

1986~1995年期间，邢先生先后主持国家自然科学基金七五重大项目“我国独特的及丰产的天然产物研究”与八五重点项目“我国边远地区和海洋独特天然产物的研究”两大课题的研究，有10余所大学和研究所参加。我们承担的子课题是“参类水溶性化学成分的研究”。研究名贵中草药人参水溶性成分中的寡肽和非蛋白氨基酸。过去对于中草药的研究主要利用极性不同的有机溶剂提取其化学成分，而服用中草药却以水煎法为主。以前对于人参化学成分的研究主要集中于皂苷成分的研究，而有关其中的肽类化合物却几乎没有涉及。分离和纯化水溶液中的寡肽有很大的困难。当时我们化学系仅有一台分析型的高效液相色谱仪，不能用于人参水提取液的制备分离。我们克服了重重困难，最终首次从人参中分离纯化了一些具有生物活性的寡肽和非编码氨基酸。该项成果获得了1995年国家教委科技进步奖一等奖。

在指导研究生的工作中，我们特别注意传承老一代科学家对科学研究严谨求实的学风。例如从人参水提取液中分离纯化了一个氧化型谷胱甘肽的异构体时，我们发现其结构就是甘氨酸和胱氨酸调换了位置，即C-端不是甘氨酸而是胱氨酸。邢先生认为1929年发现的谷胱甘肽到现在有60多年了，要确认一下这期间是否已有人发现了这个异构体。我和几位博士生、博士后反复查阅文献，的确未见文献报道。后来又用化学法合成这个异构体再与从人参水提取物对照，确认结构无误后才发表了这个研究结果[29-30]。1987年，我在为研究生开设“生物有机化学”这门新选修课时，看到一篇文献报道猪胰脂肪酶在有机溶剂中以及高温下仍保持活性，并能在有机溶剂中进行转酯反应。这篇文章引起我极大的兴趣。蛋白水解酶是水解肽键的，可否在有机溶剂中用蛋白水解酶形成肽键？可否用分子筛固定蛋白水解酶在有机溶剂中进行肽的合成反应？经由研究生查阅文献，结果没有找到相关的报道，我认为是好事，可以由此开拓创新的研究空间。经过十多年的研究，我们终于在不同的有机溶剂中，成功地用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、木瓜酶、枯草杆菌蛋白酶等合成了一系列生物活性肽，并研究了各种因素对合成的影响。为了扩大蛋白水解酶的应用范围，改变酶催化反应的底物过于专一的限制，我们用非编码氨基酸，D-氨基酸，甚至结构与氨基酸完全不同的甾体化合物作为底物，在有机溶剂中，用蛋白水解酶催化酰胺键的形成，最后得到了预期的目标化合物[31-32]。我们还探索将不同的蛋白水解酶固定在不同结构的分子筛上合成了一些小肽，在一定条件下固定化酶可以重复使用，延长了酶的寿命。此外，还研究了各种因素对固定化酶催化的影响。我们的研究结果在Tetrahedron(四面体) 杂志发表后[33]，应美国Applied Biochemistry and Biotechnology杂志主编之邀，撰写了一篇有关分子筛固定化酶的综述[34]。

所有肽段质量最后与数据库中理论肽段质量相配比（理论肽是由实验所用的酶来“断裂”蛋白产生的）。在protamex酶解条件下，若温度和ph值都不变，a仅取决于pk值，由于游离氨基酸、二肽和三肽氨基基团pk值比多肽稍高¨们，采用protamex水解时，由于含部分外切酶，所以酶解产物含有较多游离氨基酸和二肽、三肽，故在用ph-stat法测定水解度时i／a偏低就导致计算水解度降低。②有分支代谢途径的调节在有两种或两种以上的末端产物的分支合成代谢途径中，调节方式较复杂，其共同特点是每个分支途径的末端产物控制分支点后的第一个酶，同时每个末端产物又对整个途径的第一个酶有部分的抑制作用，分支代谢的反馈调节方式有多种:。