胡萝卜素的大米，胡萝卜素在人体内会转化成维生素A，可以缓解人

1. 胡萝卜含a胡萝卜素、b胡萝卜素、y胡萝卜素、e胡萝卜素和多种类萝卜素、维生素、脂肪油、多种挥发油、有机酸、胡 萝卜碱及多种降糖成分。甘蓝中含有丰富的维生素c，维生素e，维生素u，胡 萝卜素，钙、锰，钼以及纤维素。其中中氨基酸、维生素及矿物质微量元素的含量远远高于普通大米，在响水大米中富含人体所需的十八种氨基酸，含量达6.9%，在人体所不能合成的八种氨基酸中，响水大米就含有7种。

（1）图1原理中X表示；Y过程表示．

（2）图1中Z过程需要用到的植物激素是（多选）

A．生长激素 B．细胞分裂素 C．赤霉素 D．脱落酸 E．乙烯 F．吲哚乙酸

根癌农杆菌介导法转基因需要利用根癌农杆菌的Ti质粒完成，图2是Ti质粒的具体组成．（T-DNA区大小约17kb）

21.构建限制性酶切图谱的基本步骤1 对dna分子上每个限制性内切酶单酶切得到片段的数量和大小通过凝胶电泳来确定2单酶切结果被一系列双酶切结果加以补充3对比单酶切和双酶切结果，坐图谱标记出部分甚至全部的限制性位4对模棱两可的地方通过部分酶切结果进一步确定。在载体中进行重组：通过限制内切酶将两个dna片段进行酶切并回收。（2）若对符合设计要求的重组质粒a进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据表中信息分析若采用bamhi和psti酶切，可得到种dna片段．。

35.根瘤农杆菌与植物细胞的化学分子内共生原理1损伤植物细胞产生酚类物质，作为农杆菌的侵染信号2这些化学诱导物通过农杆菌的细胞膜活化毒区a和毒区g基因，诱导毒区的其它基因3毒区基因的活化作用于t-dna的加工和t-dna的转移4.t-dna进入植物细胞后，整合到植物核dna上5.t-dna在植物细胞中表达，产生冠瘿碱及植物激素6.农杆菌ti质粒上有转移型冠瘿碱分解酶基因，该基因启动合成各种酶，分解植物细胞产生的冠瘿碱作为唯一的碳源和氮源7.冠瘿碱促进农杆菌的附着，有利于ti质粒的结合转移，扩大侵染范围。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因，以下分析不合理的是()a．若用ti质粒作为抗旱基因的载体，要保证复制原点和用于转移t－dna的基因片段不被破坏b．农杆菌转化法自然条件下用于将目的基因导入双子叶植物和裸子植物c．用含有重组ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞，可以通过植物组织培养技术培育出具有抗旱基因的植物d．若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因，则说明该基因工程项目获得成功18．北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。据已测序的上西早生柿etr5基因序列,设计了2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,pcr扩增到2个etr5-uenishiwase基因片段.2个片段经单酶切消化后连接成反向互补的大片断.连接片断经双酶切消化后,定向连接到植物表达载体psmak321的35s启动子和nos终止子之间,构建成uenishiwase-etr5基因的rna干扰植物表达载体.载体质粒经酶切鉴定正确后通过冻融法转入根癌农杆菌eha101中.以上西柿组培苗叶片为外植体,优化遗传转化体系,结果表明:农杆菌重悬液和共培养基中均添加200 μmol/l的as及spc梯度筛选能有效提高转化率.转化植株经pcr检测得到7株阳性植株.。

（5）根癌农杆菌介导法转基因原理如图4所示．当植物受伤时会产生一种信号分子，该信号会作用于农杆菌细胞表面的．试分析接受信号分子后农杆菌将T-DNA导入植物细胞的过程：．

微生物及基因工程据统计，维生素A缺乏每年导致67万名五岁以下儿童死亡．因此科学家研发了一种通过基因工程使得稻米的食用部分胚乳含有维生素A的前体--胡萝卜素的大米，胡萝卜素在人体内会转化成维生素A，可以缓解人体维生素A缺乏．这种大米因胡萝卜素含量极高因而呈现金黄色，被称为“黄金大米”．黄金大米的制作过程应用了根癌农杆菌介导法进行转基因操作，将能够合成胡萝卜素的酶的基因重组后导入大米的基因组中，具体原理如图1所示．

（1）图1原理中X表示；Y过程表示．

（2）图1中Z过程需要用到的植物激素是（多选）

A．生长激素B．细胞分裂素C．赤霉素D．脱落酸E．乙烯F．吲哚乙酸

根癌农杆菌介导法转基因需要利用根癌农杆菌的Ti质粒完成，如图是Ti质粒的具体组成．（T-DNA区大小约17kb）

（3）若将图3质粒用限制酶I与限制酶II进行完全酶切（各个片段大小不一致），并用凝胶电泳分离酶切后的片段，则电泳结果应为如图4（箭头为电泳方向）中的．将胡萝卜素基因整合进入Ti质粒时，使用限制酶II进行酶切后进行连接，当整合后的Ti质粒进入农杆菌后，需要对农杆菌进行培养，下表为培养农杆菌用的YEB培养基．

牛肉膏

酵母膏

蛋白胨

蔗糖

琼脂

（4）据表分析农杆菌的同化作用类型为型．

（5）该培养基从物理形态上分应属于培养基．培养基配制完成后需要进行高压蒸汽灭菌，其条件是．

（6）由表中可知，该培养基含有下列营养成分中的（多选）

A．碳源B．氮源C．无机盐D．生长因子

35.根瘤农杆菌与植物细胞的化学分子内共生原理1损伤植物细胞产生酚类物质，作为农杆菌的侵染信号2这些化学诱导物通过农杆菌的细胞膜活化毒区a和毒区g基因，诱导毒区的其它基因3毒区基因的活化作用于t-dna的加工和t-dna的转移4.t-dna进入植物细胞后，整合到植物核dna上5.t-dna在植物细胞中表达，产生冠瘿碱及植物激素6.农杆菌ti质粒上有转移型冠瘿碱分解酶基因，该基因启动合成各种酶，分解植物细胞产生的冠瘿碱作为唯一的碳源和氮源7.冠瘿碱促进农杆菌的附着，有利于ti质粒的结合转移，扩大侵染范围。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因，以下分析不合理的是()a．若用ti质粒作为抗旱基因的载体，要保证复制原点和用于转移t－dna的基因片段不被破坏b．农杆菌转化法自然条件下用于将目的基因导入双子叶植物和裸子植物c．用含有重组ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞，可以通过植物组织培养技术培育出具有抗旱基因的植物d．若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因，则说明该基因工程项目获得成功18．北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。据已测序的上西早生柿etr5基因序列,设计了2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,pcr扩增到2个etr5-uenishiwase基因片段.2个片段经单酶切消化后连接成反向互补的大片断.连接片断经双酶切消化后,定向连接到植物表达载体psmak321的35s启动子和nos终止子之间,构建成uenishiwase-etr5基因的rna干扰植物表达载体.载体质粒经酶切鉴定正确后通过冻融法转入根癌农杆菌eha101中.以上西柿组培苗叶片为外植体,优化遗传转化体系,结果表明:农杆菌重悬液和共培养基中均添加200 μmol/l的as及spc梯度筛选能有效提高转化率.转化植株经pcr检测得到7株阳性植株.。

将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法。35.根瘤农杆菌与植物细胞的化学分子内共生原理1损伤植物细胞产生酚类物质，作为农杆菌的侵染信号2这些化学诱导物通过农杆菌的细胞膜活化毒区a和毒区g基因，诱导毒区的其它基因3毒区基因的活化作用于t-dna的加工和t-dna的转移4.t-dna进入植物细胞后，整合到植物核dna上5.t-dna在植物细胞中表达，产生冠瘿碱及植物激素6.农杆菌ti质粒上有转移型冠瘿碱分解酶基因，该基因启动合成各种酶，分解植物细胞产生的冠瘿碱作为唯一的碳源和氮源7.冠瘿碱促进农杆菌的附着，有利于ti质粒的结合转移，扩大侵染范围。(5)基因工程包括四个步骤，其中最核心的步骤是基因表达载体的构建，抗病基因导入植物细胞的常用方法是农杆菌转化法。