表达质粒载体_质粒载体和噬菌体载体_质粒进入细胞如何表达

我们实验室分离到了一株氧化葡萄糖酸杆菌，能够有效得提高某个催化反应。老师想让我提高一下，这株菌催化该反应的酶的表达量。因为大肠杆菌中没有这种酶的辅酶再生系统，所以要在氧化葡萄糖杆菌内部构建质粒，而现在关于这方面的文献很少。

目前通用的几种质粒都不能在此菌中稳定存在，所以老师让我从此菌的内源性质粒入手，构建一种新的质粒。

请问我要构建的这种质粒是不是属于表达质粒载体？这种质粒构建时与克隆载体的构建有什么区别吗？是不是难度会更大一些？

我是一名新手，现在一点思路都没有，希望前辈们能多多指点。先谢过大家了

表达质粒载体与克隆质粒载体有什么区别：功能和部件不一样。

克隆载体：

（1）载体能够独立的复制；

（2）具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记。

表达质粒载体：

（1）载体能够独立的复制；

（2）具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记。且克隆位点应在启动子序列后， 以使克隆的外源基因得以表达；

（3）具有很强的Promoter，能为大肠杆菌的RNA聚合酶所识别；

（4）具有Repressor，使启动子受到控制，只有当诱导时才能进行转录；

（5）具有很强的终止子，以便使RNA聚合酶集中力量转录克隆的外源基因， 而不转录无关的基因。

（6）所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号，即起始密码AUG和SD序列， 以便转录后能顺利翻译。

工作的第一是了解内源质粒的特性，寻找合适的酶切位点，与目的基因连接。

转化后的表达问题还有许多，看你的运气了。

如果工业化生产那就不是你的问题了，要看老板的战略思想是否对头了!

老板说先不要管表达效率的高低，只要能构建出能稳定存在于氧化葡萄糖杆菌中的多拷贝质粒就行。至于优化那是后期工作

可是现在关于这种菌内源性质粒的文献很少。而且这种内源性质粒是低拷贝的，要先把它变成高拷贝的才行